目的 研究糖化低密度脂蛋白(Gly-LDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的炎症损伤及Toll样受体4(TLR4)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,并探讨其可能的机制.方法 体外培养HUVECs,实验分为对照组、阳性对照组[50 mg/L普通低密度脂蛋白(n-LDL)]、Gly-LDL(50、75、100 mg/L)组.CCK-8法测定细胞增殖情况;划痕实验测定细胞迁移能力;ELISA法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)分泌水平;qRT-PCR测定TLR4、HIF-1α、TNF-α、IL-6 mRNA水平;Western blot测定TLR4、HIF-1α、TNF-α、IL-6蛋白水平;分别用TLR4、HIF-1α 的si-RNA干预Gly-LDL对HUVECs的作用,实验分为对照组、模型组(Gly-LDL 100 mg/L)、si-TLR4组(Gly-LDL 100 mg/L+si-TLR4)、TLR4空载组(Gly-LDL 100 mg/L+si-NC1)、si-HIF-1α组(Gly-LDL 100 mg/L+si-HIF-1α)和HIF-1α 空载组(Gly-LDL 100 mg/L+si-NC2).Western blot法检测TLR4、HIF-1α蛋白表达水平,验证TLR4、HIF-1α 相互作用关系.结果 Gly-LDL(50、75、100 mg/L)组均可抑制HUVECs的增殖及迁移能力(P<0.01),刺激HUVECs中炎症细胞因子TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1分泌量增加(P<0.001),上调TLR4、HIF-1α、TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白水平(P<0.05),并呈浓度依赖性.敲除TLR4后,与模型组相比,TLR4、HIF-1α蛋白表达均下调(P<0.001).敲除HIF-1α后,与模型组相比,仅HIF-1α蛋白表达下调(P<0.001),而TLR4蛋白在Gly-LDL作用下表达上调.结论 Gly-LDL可能通过上调TLR4/HIF-1α炎症信号通路抑制HUVECs的增殖与迁移,上调炎症细胞因子表达,导致血管内皮损伤.

糖化低密度脂蛋白;人脐静脉内皮细胞;Toll样受体4;缺氧诱导因子-1α

邱军辉;刘美志;孙杜桑;潘婷;赵维维;沙雯君;鲁郡;雷涛

安徽医科大学上海普陀中心临床学院,上海 200062;上海中医药大学附属普陀医院内分泌科,上海 200062;成都中医药大学医学与生命科学学院,成都 610000

安徽医科大学学报

[1]邱军辉;刘美志;孙杜桑;潘婷;赵维维;沙雯君;鲁郡;雷涛-.TLR4/HIF-1α信号通路介导糖化低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞损伤)[J].安徽医科大学学报,2022(10):1614-1620

糖化低密度脂蛋白,L+si

TLR4,HIF,人脐静脉内皮细胞,内皮细胞损伤,Gly,LDL,HUVECs,炎症损伤,伤及,Toll,样受体,缺氧诱导因子,体外培养,阳性对照,CCK,划痕实验,实验测定,细胞迁移能力,细胞间黏附分子,ICAM,血管细胞黏附分子,VCAM,泌水,qRT,blot,空载,NC1,NC2,蛋白表达水平,相互作用关系,可抑制,炎症细胞因子,分泌量,浓度依赖性,敲除,炎症信号通路,血管内皮损伤

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