典型文献
lncRNA-MIAT对肿瘤相关巨噬细胞M2型极化的作用及其机制
文献摘要:
目的:探讨lncRNA-MIAT对肿瘤相关巨噬细胞M2型极化的作用,并阐明其可能的作用机制.方法:体外培养THP-1细胞,将过表达(LV-MIAT)与下调lncRNA-MIAT表达(LV-shMIAT)的慢病毒颗粒及空载体(LV-Vector)转染入THP-1细胞中,将THP-1细胞诱导活化为巨噬细胞,并采用Transwell共培养体系将活化后的巨噬细胞与骨肉瘤(OS)MG63细胞共培养,将上述共培养体系分为MG63+LV-Vector组(阳性对照组)、MG63+LV-shMIAT组、MG63+LV-MIAT组和IL-4+LV-Vector组.检测各组THP-1细胞中lncRNA-MIAT表达水平,流式细胞术检测各组细胞中M2型巨噬细胞百分率,ELISA法检测各组THP-1细胞上清液中血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素4(IL-10)和转化生长因子β1(TGF-β1)水平,检测各组HUVEC中血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)、Notch1和δ样蛋白4(DLL4)表达水平.取各培养体系中的巨噬细胞与人脐静脉内皮血管细胞(HUVEC)共培养,EDU染色法检测各组HUVEC增殖活力,成管实验检测HUVEC血管形成数.Western blotting法检测各组THP1中Janus激酶1(JAK1)、信号传导及转录激活蛋白6(STAT6)和磷酸化STAT6(p-STAT6)蛋白表达水平,并计算p-STAT6/STAT6比值.构建OS荷瘤小鼠模型,并将36只荷瘤小鼠分为LV-Vector组、LV-shMIAT组和LV-MIAT组(n=12).检测干扰lncRNA-MIAT表达后各组小鼠肿瘤体积和质量及肿瘤组织中CD163和CD31阳性表达率.结果:采用慢病毒感染成功建立稳定过表达或下调lncRNA-MIAT的THP-1细胞.与LV-Vector组比较,LV-shMIAT组细胞中lncRNA-MIAT表达水平明显降低(P<0.05),LV-MIAT组细胞中lncRNA-MIAT表达水平明显升高(P<0.05).与MG63+LV-Vector组比较,MG63+LV-shMIAT组THP-1细胞中VEGF、IL-10和TGF-β1水平明显降低(P<0.05),HUVEC中VEGFR2、Notch1和DLL4蛋白表达水平明显降低(P<0.05),MG63+LV-MIAT组和IL-4+LV-Vector组THP-1细胞中VEGF、IL-10和TGF-β1水平明显升高(P<0.05或P<0.01),HUVEC中VEGFR2、Notch1和DLL4蛋白表达水平明显升高(P<0.05),M2型巨噬细胞百分率、THP-1细胞中p-STAT6/STAT6比值和JAK1蛋白表达水平升高(P<0.05);与MG63+sh-MIAT组比较,MG63+LV-MIAT组和IL-4+LV-Vector组THP-1细胞中VEGF水平明显降低(P<0.05),IL-10和TGF-β1水平明显升高(P<0.05),HUVEC中VEGFR2、Notch1和DLL4蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与MG63+LV-Vector组比较,MG63+LV-shMIAT组HUVEC的增殖活力与血管形成数均明显降低(P<0.05),MG63+LV-MIAT组和IL-4+LV-Vector组HUVEC的增殖活力与血管形成数均明显升高(P<0.05).裸鼠体内成瘤实验,与LV-Vector组比较,LV-MIAT组小鼠移植瘤体积和质量明显升高(P<0.05),肿瘤组织中CD163和CD31阳性表达率明显升高(P<0.05);LV-shMIAT组小鼠移植瘤体积和质量、肿瘤组织中CD163和CD31阳性表达率均明显降低(P<0.05).与LV-shMIAT组比较,LV-MIAT组小鼠移植瘤体积和质量明显升高(P<0.05),肿瘤组织中CD163与CD31阳性表达率明显升高(P<0.05).结论:lncRNA MIAT可能通过促进巨噬细胞的M2极化和上调肿瘤组织血管生成,参与调控OS进展.
文献关键词:
骨肉瘤;lncRNA-MIAT;M2型巨噬细胞;肿瘤血管;人脐静脉内皮血管细胞
中图分类号:
作者姓名:
许静;郭健;蒲兴魏;李大星
作者机构:
贵州省骨科医院骨内科,贵州 贵阳550000;贵州省骨科医院脊柱科,贵州 贵阳550000
文献出处:
引用格式:
[1]许静;郭健;蒲兴魏;李大星-.lncRNA-MIAT对肿瘤相关巨噬细胞M2型极化的作用及其机制)[J].吉林大学学报(医学版),2022(06):1462-1473
A类:
shMIAT,MG63+LV,4+LV,人脐静脉内皮血管细胞,MG63+sh
B类:
lncRNA,肿瘤相关巨噬细胞,M2,体外培养,过表达,慢病毒颗粒,空载,Vector,转染,细胞诱导,Transwell,共培养体系,骨肉瘤,OS,细胞共培养,阳性对照,流式细胞术,百分率,上清液,血管内皮生长因子,转化生长因子,TGF,HUVEC,血管内皮细胞生长因子受体,VEGFR2,Notch1,DLL4,EDU,染色法,增殖活力,成管实验,实验检测,血管形成,blotting,THP1,Janus,JAK1,信号传导,转录激活蛋白,STAT6,磷酸化,蛋白表达水平,荷瘤小鼠,小鼠模型,肿瘤体积,肿瘤组织,CD163,CD31,阳性表达率,慢病毒感染,染成,裸鼠,体内成瘤,小鼠移植瘤,血管生成,肿瘤血管
AB值:
0.146004
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