目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)RP11-490M8.1在内皮细胞中对炎症因子的调控作用及其对动脉粥样硬化发生、发展的影响.方法 收集3对AS斑块组织和动脉内膜正常组织进行基因芯片分析,挖掘表达显著异常的基因;用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)浓度梯度和时间梯度处理内皮细胞、构建慢病毒载体过表达LncRNA RP11-490M8.1,以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LncRNA RP11-490M8.1和细胞炎症因子如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、核转录因子-κB(NF-κB)的RNA水平,以免疫印迹(western blot)法检测细胞炎症因子(IL-6、TNF-α、NF-κB)的蛋白表达水平.最后将内皮细胞接种于6孔细胞培养板中,分为4组进行干预:(1)慢病毒空载体对照组(对照组):慢病毒空载体(LV-MOCK)转染内皮细胞培养24 h;(2)慢病毒空载体加LPS(LV-MOCK+LPS):LV-MOCK转染内皮细胞培养6 h,加1000 ng/mL的LPS培养18 h;(3)慢病毒过表达组(LV-LncRNA RP11-490M8.1):LV-LncRNA RP11-490M8.1转染内皮细胞培养24 h;(4)LncRNA RP11-490M8.1过表达加LPS(LV-LncRNA RP11-490M8.1+LPS):LV-LncRNA RP11-490M8.1转染内皮细胞培养6 h,加1000 ng/mL的LPS培养18 h.结果 基因芯片分析发现LncRNA RP11-490M8.1在AS斑块中表达下调,qRT-PCR和western blot结果显示LPS上调炎症因子(IL-6、TNF-α、NF-κB)的表达;慢病毒过表达LncRNA RP11-490M8.1后炎症因子表达下调;分组干预实验结果显示LncRNA RP11-490M8.1能减弱LPS对炎症因子的诱导作用.结论 在内皮细胞中LncRNA RP11-490M8.1抑制LPS诱导的炎症因子(IL-6、TNF-α、NF-κB)表达,LncRNA RP11-490M8.1很可能是药物发挥抗炎作用的靶向分子,为动脉粥样硬化的发展提供新的方向.

长链非编码RNA;LPS;炎症;动脉粥样硬化

刘雪辉;吴丽美;刘达彬;李志海;刘华森;伍绍国;胡炎伟

广州市第十二人民医院检验科 广东广州510620;广州市妇女儿童医疗中心检验部 广东广州510623

广东医学

[1]刘雪辉;吴丽美;刘达彬;李志海;刘华森;伍绍国;胡炎伟-.长链非编码RNA RP11-490M8.1对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎症的影响)[J].广东医学,2022(05):549-555

490M8,MOCK,MOCK+LPS

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