目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)MIR22HG通过微小RNA-9-3p(miR-9-3p)调节细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)抑制前列腺癌的机制.方法 收集26例前列腺癌组织样本和26例前列腺增生组织样本,培养VCAP、PC3、LNCap和DU145细胞.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测前列腺癌组织、前列腺增生组织及4种前列腺癌细胞的MIR22HG和miR-9-3p mRNA水平.筛选MIR22HG和miR-9-3p mRNA表达较高的细胞.将筛选出的细胞按不同干预方法分为 OE-CTLA4(CTLA4 过表达组)、OE-MIR22HG(MIR22HG 过表达组)、miR-9-3p mimic(miR-9-3p 过表达组)、OE-MIR22HG+miR-9-3p mimic(MIR22HG 及 miR-9-3p 联合过表达组)、OE-NC+NC mimic(转染对照组)、NC mimic(miR-9-3p过表达对照组).采用TargetScan数据库及荧光素酶报告基因实验验证MIR22HG与miR-9-3p及miR-9-3p与CTLA4是否存在靶向抑制关系.采用qRT-PCR及Western blot检测各组细胞MIR22HG和miR-9-3p mRNA及CTLA4蛋白表达.取裸鼠96只,按干预方法不同分为OE-NC+NC mimic组(转染对照)、OE-MIR22HG组(MIR22HG过表达)及OE-MIR22HG+miR-9-3p mimic组(MIR22HG及miR-9-3p联合过表达),每组32只.接种后4周期间,每周检测小鼠原位移植瘤并统计瘤体的质量和体积变化.结果 前列腺癌细胞VCAP、PC3、LNCap和DU145细胞中,PC3细胞MIR22HG mRNA相对较低,miR-9-3p mRNA相对较高,因此选择PC3细胞进行研究.在PC3细胞中成功过表达MIR22HG,荧光素酶报告基因实验验证了 MIR22HG和miR-9-3p的靶向抑制关系,过表达MIR22HG,miR-9-3p表达下调,差异有统计学意义(P＜0.05).TargetScan数据库预测免疫基因CTLA4和miR-9-3p的靶向关系,荧光素酶报告基因实验验证miR-9-3p和CTLA4的靶向抑制关系,过表达miR-9-3p,CTLA4表达上调,差异有统计学意义(P＜0.05).过表达MIR22HG的裸鼠皮下肿瘤的质量降低,差异有统计学意义(P＜0.05).OE-MIR22HG+miR-9-3p mimic组裸鼠皮下肿瘤的质量、体积与OE-NC+NC mimic组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MIR22HG与miR-9-3p存在靶向负调节关系,miR-9-3p与CTLA-4存在靶向调节关系,MIR22HG/miR-9-3p可能通过抑制CTLA4达到免疫治疗前列腺癌的目的.

长链非编码RNA MIR22HG;微小RNA-9-3p;细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4;前列腺癌

张伟;施春梅;朱华;顾栋华;潘晓东;陈新凤;郑兵

南通大学第二附属医院/江苏省南通市第一人民医院泌尿外科,江苏南通,226000

实用临床医药杂志

[1]张伟;施春梅;朱华;顾栋华;潘晓东;陈新凤;郑兵-.长链非编码RNA MIR22HG通过微小RNA-9-3p调节CTLA4抑制前列腺癌)[J].实用临床医药杂志,2022(23):40-45,54

VCAP,MIR22HG+miR,NC+NC

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