目的 探讨Wilms肿瘤抑制因子1相关蛋白(Wilms'tumor 1-associating protein,WTAP)在小胶质细胞活化调控中的作用及其可能的分子机制.方法 用100 ng/mL IFNγ联合1 μg/mL LPS诱导HMC3小胶质细胞M1极化作为实验组,以未处理的细胞作为空白对照组,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞中促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α和N6-甲基腺苷(m6A)相关基因的表达,在HMC3小胶质细胞中转染RNAi慢病毒敲低WTAP,使用实时荧光定量PCR和Western blot检测敲低效率,Western blot检测敲低HMC3小胶质细胞WTAP后促炎细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α蛋白表达,Western blot检测敲低WTAP后HMC3小胶质细胞沉默信息调节因子2相关酶1(silent mating-type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)、COP1、USP18、EP4、促炎转录因子和部分炎症相关通路受体的表达,使用SIRT1激动剂SRT1720和SIRT1抑制剂EX527分别处理空载病毒组和敲低WTAP组HMC3细胞后,Western blot检测c/EBPβ的表达.结果 与空白对照组比较,100 ng/mL IFNγ联合1 μg/mL LPS诱导的HMC3细胞IL-6、IL-1β、TNF-α表达上调(P＜0.05).M1极化的HMC3小胶质细胞中WTAP高表达(P＜0.05).敲低WTAP后,HMC3细胞促炎细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α表达降低(P＜0.05),SIRT1表达升高(P＜0.05),且促炎转录因子c/EBPβ表达降低(P＜0.05).SIRT1激动剂SRT1720使空载病毒组相对高表达的c/EBPβ降低(P＜0.01).SIRT1抑制剂EX527使敲低WTAP的HMC3细胞相对低表达的c/EBPβ升高(P＜0.05).结论 WTAP促进HMC3小胶质细胞M1极化,其作用机制可能与通过调控SIRT1表达进而影响c/EBPβ信号通路有关.

小胶质细胞;Wilms肿瘤抑制因子1相关蛋白;沉默信息调节因子2相关酶1;N6-甲基腺苷;细胞极化

周虹秀;高煦;侯胜平

400016重庆,重庆医科大学附属第一院眼科,眼科学重庆市重点实验室,重庆市眼科研究所;402760重庆,重庆市璧山区人民医院眼科

陆军军医大学学报

[1]周虹秀;高煦;侯胜平-.WTAP通过调控SIRT1诱导小胶质细胞M1型极化的研究)[J].陆军军医大学学报,2022(07):620-629

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