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HMGA23'-UTR双荧光素酶报告载体构建及与miR-33b-5p的靶向验证
文献摘要：
目的:构建野生型及突变型HMGA2基因3'-非编码区(3'-UTR)的双荧光素酶报告基因载体,验证miR-33b-5p与HMGA2之间的靶向关系.方法:生物信息学相关软件预测miR-33b-5p与HMGA2之间的靶向关系;PCR扩增HMGA2的基因片段,构建HMGA2野生型和突变型双荧光素酶报告载体;将miR-33b-5p和阴性对照物分别与野生型GV272-HMGA2-wt-3'-UTR或突变型GV272-HMGA2-mut-3'-UTR双荧光素酶报告载体共转染293T细胞,然后检测荧光素酶的活性.结果:成功构建野生型及突变型HMGA2基因3'-非编码区(3'-UTR)的双荧光素酶报告基因载体,双荧光素酶报告系统的结果显示,加入miR-33b-5p可使野生型GV272-HMGA2-wt-3'-UTR的荧光素酶活性降低,但突变型GV272-HMGA2-mut-3'-UTR的荧光素酶活性与对照组相比则未发生显著变化.结论:野生型及突变型HMGA23'-UTR双荧光素酶报告载体构建成功;miR-33b-5p与HMGA2之间存在靶向关系.
文献关键词：
HMGA2;3’-非编码区;双荧光素酶报告载体;miR-33b-5p
中图分类号：
作者姓名：
胡海红;吴怡雯;李擎;张以宁;彭晶;谢志忠;雷小勇;杨晓燕
作者机构：
南华大学衡阳医学院,药学院药物药理研究所,衡阳 421001;南华大学肿瘤微环境响应药物研究湖南省重点实验室,衡阳421001
文献出处：
引用格式：
[1]胡海红;吴怡雯;李擎;张以宁;彭晶;谢志忠;雷小勇;杨晓燕-.HMGA23'-UTR双荧光素酶报告载体构建及与miR-33b-5p的靶向验证)[J].中国免疫学杂志,2022(24):3027-3031
A类：
HMGA23,GV272
B类：
UTR,双荧光素酶报告载体,载体构建,miR,33b,5p,野生型,突变型,非编码区,双荧光素酶报告基因载体,相关软件,软件预测,wt,mut,共转染,293T,双荧光素酶报告系统,荧光素酶活性
AB值：
0.12032
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