目的 建立BV2小胶质细胞缺氧模型并对12种中药单体或复方进行药物活性筛选.方法 将BV2细胞随机分为常氧组和缺氧模型组.常氧组正常培养,缺氧模型组采用缺氧培养箱建立缺氧损伤细胞模型,采用CCK?8法检测缺氧及药物作用对BV2细胞存活率的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡、活性氧(ROS)水平、线粒体膜电位(MMP)变化;比色法检测BV2细胞超氧化物歧化酶(SOD)含量变化;免疫荧光法检测缺氧诱导因子?1α(HIF?1α)表达变化;Western印迹检测HIF?1α、帕金蛋白(Parkin)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶?1(caspase?1)、白细胞介素?1β(IL?1β)表达.结果 与常氧组相比,缺氧可降低BV2细胞存活率,诱导细胞发生凋亡,并促使细胞内ROS大量堆积,线粒体膜电位和SOD活力降低;同时,缺氧还可激活NLRP3/caspase?1信号通路,促进NLRP3、caspase?1、IL?1β和HIF?1α蛋白表达,抑制Parkin蛋白表达.其中缺氧24 h组各项指标变化最为明显,故采用该条件进行后续实验.发现复方丹参滴丸干预后细胞活力回升,细胞凋亡率和ROS水平降低,线粒体膜电位水平升高.结论 BV2细胞缺氧24 h可构建稳定的缺氧模型;复方丹参滴丸对缺氧后BV2细胞具有一定的保护作用.

BV2小胶质细胞;缺氧;活性氧;细胞凋亡;线粒体膜电位;中药活性

阮盼盼;闫佳怡;张祖奇;张光晨;张慧婷;王宇光;高月

河北大学生命科学学院,河北保定 071002;军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所,北京 100850;广东药科大学药学院,广州 511400

军事医学

[1]阮盼盼;闫佳怡;张祖奇;张光晨;张慧婷;王宇光;高月-.BV2小胶质细胞缺氧模型建立及中药活性筛选)[J].军事医学,2022(05):371-378

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