目的 基于miR-34a/沉默信息调节因子1(SIRT1)轴探讨柚皮素对H2 O2诱导的人视网膜色素上皮细胞(RPE)氧化损伤的保护作用.方法 MTT法检测不同浓度的柚皮素对H2 O2诱导的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19存活率的影响以选取适宜柚皮素浓度为后续实验浓度.取对数期生长的ARPE-19细胞分为对照组、H2O2组(200μmol/L)、20μg/mL柚皮素组、20μg/mL柚皮素+mimics NC组、20μg/mL柚皮素+miR-34a mimics组.采用RT-qPCR检测细胞中miR-34a和SIRT1 mRNA的表达,MTT法及Annexin V-FITC/PI双染分别检测细胞存活与凋亡情况,荧光探针检测细胞内ROS水平,生化法检测SOD活性、MDA和GSH水平,并采用JC-1法检测线粒体膜电位(MMP),Western blot检测SIRT1及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达.结果 与对照组相比,H2O2组ARPE-19细胞中miR-34a表达、ARPE-19细胞凋亡率、ROS、MDA含量、Bax和Caspase-3表达显著升高(P<0.05),SIRT1 mRNA表达、ARPE-19细胞存活率、SOD、GSH含量、MMP水平、SIRT1和Bcl-2表达显著降低(P<0.05);与H2 O2相比,柚皮素可改善H2 O2诱导的ARPE-19细胞损伤,下调miR-34a表达,降低ROS、MDA、Bax和Caspase-3含量(P<0.05),上调SIRT1、MMP、Bcl-2表达,增加GSH、SOD活性(P<0.05);上调ARPE-19细胞miR-34a的表达,可逆转柚皮素对H2 O2诱导的RPE细胞氧化损伤的保护作用.结论 柚皮素可能通过下调miR-34a,促进SIRT1的表达,抑制RPE细胞凋亡,保护H2 O2诱导的RPE细胞氧化损伤.

柚皮素;视网膜色素上皮细胞;氧化损伤;miR-34a;沉默信息调节因子1

魏抗抗;董伟华;帖红艳;何章彪;赵琳

商丘医学高等专科学校五官科教研室,河南 商丘 476006;郑州大学基础医学院人体解剖学教研室,郑州 450001

中国比较医学杂志

[1]魏抗抗;董伟华;帖红艳;何章彪;赵琳-.基于miR-34a/SIRT1轴研究柚皮素对H2O2诱导的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用)[J].中国比较医学杂志,2022(04):77-85

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