典型文献
鸭IFNα-AvBD2融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达及生物学活性检测
文献摘要：
鸭(Anas platyrhynchos)α干扰素(interferonα,IFNα)具有广谱的抗病毒活性,禽β防御素2(avianβ-defensin 2,AvBD2)具有广谱的抗菌活性.本研究利用毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达鸭IFNα-AvBD2融合蛋白并明确IFNα-AvBD2的生物学活性,对于现有无抗养殖条件下的鸭疫病防控具有重要意义.本课题组在前期工作中已成功构建了原核表达质粒pET32a-AplIFNα-AvBD2,并在大肠杆菌(Escherichia coli)中成功表达.本研究以实验室保存的pET32a-AplIFNα-AvBD2为模板,通过PCR方法扩增得到AplIFNα-AvBD2成熟蛋白的基因片段,构建重组质粒pPICZαA-AplIFNα-AvBD2;将线性化的重组质粒电转化至毕赤酵母KM71H感受态细胞,阳性重组菌经甲醇诱导表达,对表达产物进行体外生物学活性研究.SDS-PAGE和Western blot结果显示,AplIFNα-AvBD2重组蛋白分子量约为24 kD;琼脂扩散法和微量稀释法表明重组蛋白对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大肠杆菌有较强的抗菌活性;细胞病变抑制法检测重组蛋白抗病毒活性为1.2×105 U/mL,比活性为5.2×105 U/mg;MTT细胞毒性试验显示重组蛋白对非洲绿猴肾细胞(Vero)无毒.上述结果说明,AplIFNα-AvBD2可在毕赤酵母中分泌表达,同时具有抗菌活性和抗病毒活性.本研究为AplIFNα-AvBD2的进一步应用提供了基础资料.
文献关键词：
α干扰素(IFNα);β防御素2(AvBD2);毕赤酵母;融合蛋白;抗菌活性;抗病毒活性
中图分类号：
作者姓名：
豆子航;李秀丽;庞洪泽;韩颖;雷白时;赵款;庞敬红;袁万哲
作者机构：
河北农业大学动物医学院,保定071001;河北省兽医生物技术创新中心,保定071001;河北伯瑞动物药业有限公司,石家庄050800
文献出处：
引用格式：
[1]豆子航;李秀丽;庞洪泽;韩颖;雷白时;赵款;庞敬红;袁万哲-.鸭IFNα-AvBD2融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达及生物学活性检测)[J].农业生物技术学报,2022(05):957-965
A类：
AvBD2,AplIFN,KM71H,细胞病变抑制
B类：
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AB值：
0.302858
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