典型文献
牛恒定链与BoLAⅡ类分子β链活性片段的结合与定位分析
文献摘要：
牛白细胞抗原(bovine leukocyte antigen,BoLA),又名主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC),其Ⅱ类分子及其伴侣蛋白恒定链(invariant chain,Ii)在加工和递呈抗原肽中起关键作用.为了解在此过程中BoLAⅡβ链与Ii结合和在细胞内定位的特征,本研究提取了淮北黄牛(Bos taurus)血细胞mRNA并反转录为cDNA,应用PCR技术扩增牛Ii与BoLAⅡβ链及结构域的基因片段,并分别构建相应的真核和原核表达质粒.利用原核表达系统进行蛋白的表达和纯化,应用拉下法和Western blot检测Ii结合BoLAⅡβ及其片段的结合关系.应用激光共聚焦显微镜观察Ii与BoLAⅡβ链及其片段在细胞内共定位.结果显示,构建的含牛Ii、BoLAⅡβ、BoLAⅡβ(β1β2)和BoLAⅡβ(TC)基因的重组质粒转化细菌,经诱导能正确表达蛋白并得到纯化.BoLAⅡβ和BoLAⅡβ(β1β2)具有结合Ii的活性功能,而BoLAⅡβ(TC)却无此功能.同时,在真核细胞内Ii能与BoLAⅡβ及其主要结构域BoLAⅡβ(β1β2)和BoLAⅡβ(TC)共定位.综上所述,BoLAⅡβ的β1β2是结合Ii的关键结构域,而BoLAⅡβ的β1β2和TC结构域均具有与Ii在细胞内共定位功能.本研究为进一步研究牛BoLA分子与Ii在免疫应答中的转运及其机理提供了重要实验依据.
文献关键词：
牛;恒定链(Ii);牛白细胞抗原(BoLA);结合;共定位
中图分类号：
作者姓名：
陈芳芳;于凤梅;张俊;谈阳;刘翠艳;桂亚萍
作者机构：
安徽农业大学动物科技学院/安徽省人畜共患病实验室,合肥230036
文献出处：
引用格式：
[1]陈芳芳;于凤梅;张俊;谈阳;刘翠艳;桂亚萍-.牛恒定链与BoLAⅡ类分子β链活性片段的结合与定位分析)[J].农业生物技术学报,2022(10):1884-1893
A类：
BoLA
B类：
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AB值：
0.293067
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