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典型文献
重组人GM-CSF单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)肿瘤细胞杀伤活性检测方法的优化
文献摘要:
目的:优化重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating fac-tor,GM-CSF)单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)对肿瘤细胞人乳腺癌细胞(michigan cancer foundation-7,MCF-7)的杀伤活性检测方法.方法:在不同时间加入不同浓度的活性氧(reactive oxygen species,ROS)抑制剂/ROS清除剂,确定对试验影响最小,且能有效去除活性氧的条件.对优化后的方法进行精密度和适用性验证.分别采用优化前、后的方法对同一批号OrienX010样品进行3次肿瘤细胞杀伤活性检测,确定优化前、后方法是否有统计学差异.用不同代次的MCF-7细胞进行试验来确定细胞可使用代次.结果:在加入CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂前30 min左右,每孔加入50倍稀释的ROS抑制剂/ROS清除剂10μL 为最佳条件.同一试验人员于同1 d 6次测定OrienX010的杀伤活性感染复数(multiplicity of infection,MOI)半数有效量(median effective dose,ED50)的RSD为15.1%,符合可接受标准;2名实验人员于不同日每人重复测定6次OrienX010的MOI ED50的RSD为20.5%,符合可接受标准.对多批次的OrienX010进行肿瘤细胞杀伤活性检测,检测结果均符合质量标准.采用优化前、后的方法对同一批号OrienX010样品进行3次肿瘤细胞杀伤活性检测,t Stat>t双尾临界值,说明优化前、后2组数据的平均值有显著性差异.MCF-7细胞检测到P 39,检测结果均合格且稳定.结论:优化后的方法有效消除了 ROS对肿瘤细胞杀伤活性检测的影响,该方法具有良好的精密度及适用性,可用于重组人GM-CSF单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)的肿瘤细胞杀伤活性检测;优化前、后的方法有统计学差异;MCF-7细胞可使用到P 39.
文献关键词:
优化;OrienX010;人乳腺癌细胞(MCF-7细胞);活性氧;肿瘤细胞杀伤活性;CCK-8
作者姓名:
孙冬梅;王艳辉;王立谦;赵凤颖;马艳秋;王宁
作者机构:
北京奥源和力生物技术有限公司,北京100023
文献出处:
引用格式:
[1]孙冬梅;王艳辉;王立谦;赵凤颖;马艳秋;王宁-.重组人GM-CSF单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)肿瘤细胞杀伤活性检测方法的优化)[J].药物分析杂志,2022(12):2101-2109
A类:
OrienX010,肿瘤细胞杀伤活性
B类:
组人,GM,CSF,单纯疱疹病毒,注射液,活性检测,优化重组,巨噬细胞集落刺激因子,granulocyte,macrophage,colony,stimulating,fac,tor,人乳腺癌细胞,michigan,cancer,foundation,MCF,reactive,oxygen,species,ROS,清除剂,精密度,批号,后方法,统计学差异,CCK,Cell,Counting,Kit,最佳条件,复数,multiplicity,infection,MOI,半数有效量,median,effective,dose,ED50,RSD,名实,实验人员,同日,每人,复测,多批,Stat,双尾
AB值:
0.263294
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