典型文献
人类细小病毒B19核酸检测方法的建立及方法学验证
文献摘要：
目的:建立人类细小病毒B19实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测方法,并对该方法进行方法学验证.方法:针对B19病毒三种基因型的高度保守区设计特异性引物和探针,建立B19 Q-PCR标准曲线.并分别从检测限和定量限、型别覆盖能力、特异性、定量范围及定量线性、精密度、回收率、不同机型、以及不同混样模式进行方法学验证.结果:当B19病毒定量参考品范围为2.0×101～1.0×108 IUmL-1时,R2>0.99,扩增效率>97.2％,线性范围相关性良好.定量下限为20 IU·mL-1,检测下限为10 IU·mL-1,针对B19病毒3种基因型样本均能检出,具有相同的定量下限和检测下限.特异性结果显示,本方法检测甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒1型、人巨细胞病毒、戊型肝炎病毒、单纯疱疹病毒1型、梅毒螺旋体等核酸阳性血浆,均无非特异反应,且在上述病原体存在的情况下,B19病毒的定量下限和检测下限均能稳定检出,不受干扰.回收率结果显示,本方法回收率在50％-150％之间,RSD<30％.此外,本方法的精密性变异系数均小于3％,在ABI 7500和伯乐CFX-96机型上,相关技术指标均能达标.且采用48混合96混检测模式检测终浓度104 IU·mL-1和20 IU·mL-1的样本,定量要求符合标准.结论:本方法线性范围广、灵敏度高、特异性和精密度好,回收率高,且可用于不同品牌的荧光定量PCR仪,适用范围广,检测模式灵活,可用于人血浆B19病毒核酸筛查,本研究将为血液制品质量标准提高提供技术储备.
文献关键词：
人血浆;B19;实时荧光定量PCR;血液制品;质量标准
中图分类号：
作者姓名：
刘彬;朱丽媛;叶祥忠;吉尚志;张川;马莉;李长清
作者机构：
中国医学科学院北京协和医学院输血研究所,成都610052;北京万泰生物药业股份有限公司,北京102206
文献出处：
引用格式：
[1]刘彬;朱丽媛;叶祥忠;吉尚志;张川;马莉;李长清-.人类细小病毒B19核酸检测方法的建立及方法学验证)[J].中国药品标准,2022(02):161-168
A类：
IUmL
B类：
细小病毒,B19,核酸检测方法,方法学验证,立人,基因型,特异性引物,标准曲线,检测限,定量限,型别,覆盖能力,精密度,机型,样模,病毒定量,参考品,线性范围,检测下限,甲型肝炎病毒,乙型肝炎病毒,丙型肝炎病毒,人类免疫缺陷病毒,人巨细胞病毒,戊型肝炎病毒,单纯疱疹病毒,梅毒螺旋体,无非,非特异,病原体,定检,RSD,精密性,ABI,伯乐,CFX,技术指标,检测模式,模式检测,符合标准,法线,灵敏度高,不同品牌,人血浆,病毒核酸,核酸筛查,血液制品,制品质量,质量标准提高,技术储备
AB值：
0.308983
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
