根据猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)、猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3,PCV3)和猪圆环病毒4型(porcine circovirus 4,PCV4)保守区域基因序列合成特异性的引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了一种可同时快速高效鉴别检测PCV2、PCV3和PCV4的三重荧光PCR方法.结果显示,所建立的三重荧光PCR方法仅对PCV2、PCV3和PCV4出现阳性扩增,与猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪支原体肺炎(M.hyo)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等猪常见病原无交叉反应;对PCV2、PCV3和PCV4的最低检出限分别为1.69×101,1.38×102,1.42×102拷贝;组内和组间试验变异系数均小于1.6％,重复性好.进一步应用所建立的PCV2、PCV3和PCV4三重荧光PCR方法对263份猪临床样品进行检测,结果检出168份PCV2阳性(阳性率为63.88％),35份PCV3阳性(阳性率为13.31％),21份PCV4阳性(阳性率为7.98％),其中PCV2/PCV3/PCV4共感染3份(阳性率为1.14％),检测结果与单重荧光PCR方法一致.本研究所建立的PCV2、PCV3和PCV4三重荧光PCR方法可以有效的实现对PCV2、PCV3和PCV4的同时快速检测.

PCV2;PCV3;PCV4;三重荧光PCR

高艺祥;王金凤;张倩;孙晓霞;刘立兵;顾文源;马宏伟;马增军;韩庆安;王建昌

河北科技师范学院动物科技学院河北省预防兽医学重点实验室,河北 秦皇岛066004;河北省动物疫病预防控制中心,河北石家庄050035;石家庄海关技术中心,河北石家庄050051

中国兽医学报

[1]高艺祥;王金凤;张倩;孙晓霞;刘立兵;顾文源;马宏伟;马增军;韩庆安;王建昌-.PCV2、PCV3和PCV4三重荧光PCR鉴别检测方法的建立及应用)[J].中国兽医学报,2022(09):1752-1757,1763

hyo

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