典型文献
缺失VIM基因大白猪肾成纤维细胞的构建及其NF-κB和MAPK信号通路的研究
文献摘要：
波形蛋白(Vimentin,VIM)可介导多种病毒进入机体,为研究病毒的感染机理,本研究将合成的敲除VIM基因的双sgRNA克隆于pX459-puro载体中,构建pX459-puro-V-1和pX459-puro-V-2敲除载体,经电转至大白猪肾成纤维细胞中,经嘌呤霉素筛选出14株单克隆细胞株.将筛选的单克隆细胞株通过PCR鉴定、测序验证、western blot鉴定,结果显示得到1株缺失VIM基因的单克隆细胞.通过100 ng/mL的脂多糖(LPS)分别刺激该单克隆细胞株和可传代大白猪肾成纤维细胞,通过western blot检测NF-κB和MAPK信号通路中p65、p38、JNK、ERK及磷酸化蛋白p-p65、p-p38、p-JNK、p-ERK的表达水平,结果显示经LPS刺激后,缺失VIM基因的单克隆细胞和可传代大白猪肾成纤维细胞中p65、p38、JNK、ERK、p-ERK的表达水平均无明显变化;缺失VIM基因的单克隆细胞中p-p65、p-p38、p-JNK的表达水平明显低于可传代大白猪肾成纤维细胞(P<0.01).本研究得到了1株缺失VIM基因的单克隆细胞,利用该细胞株首次研究发现VIM基因缺失能够影响宿主细胞中NF-κB和MAPK信号通路中p-p65、p-p38、p-JNK的表达,从而起到降低炎症反应的作用,该缺失VIM基因的单克隆细胞为病毒感染机理的研究提供了良好的实验素材,对相关疫病的防控有重要意义.
文献关键词：
CRISPR/Cas9;VIM基因;敲除;NF-κB;MAPK
中图分类号：
作者姓名：
李凯强;王晶;肖伟;任红艳;华再东;董发明;毕延震
作者机构：
湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北 武汉 430070;河南科技大学动物科技学院,河南 洛阳 471023
文献出处：
引用格式：
[1]李凯强;王晶;肖伟;任红艳;华再东;董发明;毕延震-.缺失VIM基因大白猪肾成纤维细胞的构建及其NF-κB和MAPK信号通路的研究)[J].中国预防兽医学报,2022(09):970-976
A类：
pX459
B类：
VIM,大白猪,成纤维细胞,MAPK,波形蛋白,Vimentin,sgRNA,puro,敲除载体,转至,嘌呤霉素,单克隆细胞,细胞株,western,blot,脂多糖,LPS,可传,传代,p65,p38,JNK,ERK,磷酸化,基因缺失,失能,宿主,主细胞,疫病,CRISPR,Cas9
AB值：
0.196483
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
