典型文献
弓形虫泛素特异性蛋白酶TgUSP10的定位及其功能
文献摘要：
利用CRISPR/Cas9技术构建弓形虫泛素特异性蛋白酶TgUSP10的内源性标记虫株,经单克隆后通过PCR和Western blot对内源性标记虫株进行鉴定,并通过间接免疫荧光试验分析了 TgUSP10蛋白的亚细胞定位与表达水平;同时,构建TgUSP10敲除虫株,经单克隆后进行PCR鉴定,并通过噬斑、黏附/入侵、复制和逸出试验评估TgUSP10缺失对弓形虫体外增殖的影响.IFA结果显示,TgUSP10定位于细胞质,并在G1期、S期和分裂后期表达量较高;成功构建了 TgUSP10敲除虫株,与RH△ku80虫株相比,TgUSPI0敲除虫株形成噬斑的能力显著减弱;进一步分析体外增殖的具体过程后发现,TgUSP10敲除虫株的复制能力显著减弱,而黏附/入侵和逸出能力没有显著变化.结果表明,成功构建了 TgUSP10的内源性标记虫株,TgUSP10定位于虫体细胞质,并对弓形虫体外增殖具有重要作用,为后续进一步阐明其功能和作用机制奠定基础.
文献关键词：
弓形虫;去泛素化酶;TgUSP10;CRISPR/Cas9
中图分类号：
作者姓名：
陈璐璐;孙洪超;阳毅敏;盛楷茵;姚晨倩;陈学秋;杨怡;杜爱芳
作者机构：
浙江大学动物科学学院浙江省动物预防医学重点实验室/浙江大学动物预防医学研究所,浙江杭州310012;浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江杭州310021
文献出处：
引用格式：
[1]陈璐璐;孙洪超;阳毅敏;盛楷茵;姚晨倩;陈学秋;杨怡;杜爱芳-.弓形虫泛素特异性蛋白酶TgUSP10的定位及其功能)[J].中国兽医学报,2022(12):2444-2451
A类：
TgUSP10,TgUSPI0
B类：
弓形虫,泛素特异性蛋白酶,CRISPR,Cas9,技术构建,内源性,单克隆,blot,间接免疫荧光试验,试验分析,亚细胞定位,敲除,除虫,噬斑,逸出,虫体,体外增殖,IFA,细胞质,G1,RH,ku80,复制能力,体细胞,去泛素化酶
AB值：
0.230524
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