典型文献
猪圆环病毒-Ⅱ型、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒三重RT-qPCR检测方法的建立及初步应用
文献摘要:
针对猪圆环病毒-Ⅱ型(porcine circovirus type Ⅱ,PCV-Ⅱ)、猪瘟病毒(swine fever virus,CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的保守区域设计用 于构建荧光定量PCR体系的引物和探针.以构建的重组质粒标准品为模板建立三重荧光定量PCR体系,并对三重荧光定量PCR体系进行优化和特异性检测、灵敏性检测、重复性试验、标准曲线制作.最后利用构建的三重荧光定量PCR体系和普通PCR体系同时进行临床检测,并对两者的检测结果进行对比.结果显示,3种病毒在单重和三重荧光定量PCR体系中均无非特异性扩增;3种病毒在单重和三重荧光定量PCR体系中的灵敏度均可达到10拷贝/μL;单重和三重荧光定量PCR体系组内和组间重复性变异系数均在5%以内;单重和三重荧光定量PCR在稀释度范围内呈现良好的线性关系.应用本研究构建的三重荧光定量PCR体系对106份临床组织样品进行检测,其中PCV-Ⅱ阳性检出率为74.5%,CSFV阳性检出率为34.9%,PRRSV阳性检出率为18.9%,普通PCR检测中PCV-Ⅱ阳性检出率为37.7%,CSFV阳性检出率为16.9%,PRRSV阳性检出率为7.5%.
文献关键词:
猪圆环病毒-Ⅱ型;猪瘟病毒;猪繁殖与呼吸综合征病毒;荧光定量PCR;检测方法
中图分类号:
作者姓名:
刘斌;赵翠青;刘立明;沙万里;董文龙;刘嘉琳;李国江
作者机构:
吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;吉林省预防兽医学重点实验室,吉林吉林132109;吉林农业科技学院动物科技学院,吉林吉林132109
文献出处:
引用格式:
[1]刘斌;赵翠青;刘立明;沙万里;董文龙;刘嘉琳;李国江-.猪圆环病毒-Ⅱ型、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒三重RT-qPCR检测方法的建立及初步应用)[J].中国兽医学报,2022(07):1309-1314
A类:
B类:
猪圆环病毒,猪瘟病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,qPCR,初步应用,porcine,circovirus,type,PCV,swine,fever,CSFV,reproductive,respiratory,syndrome,PRRSV,区域设计,引物,重组质粒,标准品,立三,特异性检测,灵敏性,重复性试验,标准曲线,临床检测,单重,无非,非特异性扩增,拷贝,研究构建,阳性检出率
AB值:
0.246921
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