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HCV跨膜蛋白(P7)重组表达及化学发光法检测HCV感染者血清中抗P7抗体的建立与评价
文献摘要：
目的:建立化学发光法检测丙型肝炎病毒(HCV)感染者血清抗跨膜蛋白P7(anti-P7)抗体的方法,并进行应用评价.方法:以含有HCV 1b基因型P7核酸序列(Accession No:AJ238800)的质粒PUC-P7为模板,PCR扩增P7基因,构建重组质粒pGEX-KG-P7,P7融合蛋白经原核诱导表达、提取纯化后,间接法包被微孔板、制备化学发光法检测抗P7抗体试剂盒,并对其方法学指标进行评价.结果:质粒pGEX-KG-P7构建正确,经原核诱导表达获得相对分子质量约34 kD的P7融合蛋白,制备的化学发光法检测抗P7 抗体试剂盒方法学指标为:精密度试验(批内变异系数2.97%~4.09%,批间变异系数3.75%~5.52%),空白限和检出限分别为1.56、5.99 RLIR,相关系数r=0.998 9,分析测量范围(AMR)为1.252~18.774 RLIR,平均回收率为97.8%,类风湿因子等阳性血清标本对本试验无交叉反应,试剂盒15个月内稳定,45例HCV感染者血清抗P7抗体阳性率为20%(9/45).结论:化学发光法检测HCV感染者血清中抗P7抗体试剂盒符合方法学要求,可用于HCV感染者筛查诊断、病情监测、预后评估、疾病机制和流行病学研究,P7蛋白在HCV感染者体内存在免疫应答现象.
文献关键词：
丙型肝炎病毒;跨膜蛋白P7;抗体;检测;评价
中图分类号：
作者姓名：
吴婕;戴玉柱;张英杰;成军
作者机构：
蚌埠医学院检验医学院,蚌埠233000;联勤保障部队第903医院临床检验中心,杭州310013
文献出处：
引用格式：
[1]吴婕;戴玉柱;张英杰;成军-.HCV跨膜蛋白(P7)重组表达及化学发光法检测HCV感染者血清中抗P7抗体的建立与评价)[J].中国免疫学杂志,2022(13):1614-1620
A类：
AJ238800
B类：
HCV,跨膜蛋白,P7,重组表达,化学发光法检测,感染者,建立与评价,丙型肝炎病毒,anti,应用评价,1b,基因型,Accession,No,PUC,重组质粒,pGEX,KG,融合蛋白,原核,诱导表达,提取纯化,间接法,包被,微孔板,试剂盒,方法学,相对分子质量,kD,精密度,密度试验,检出限,RLIR,分析测量范围,AMR,类风湿因子,阳性血清,血清标本,交叉反应,抗体阳性率,筛查诊断,病情监测,预后评估,流行病学研究,免疫应答
AB值：
0.293149
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