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下调LANA对卡波氏肉瘤相关疱疹病毒复制的影响
文献摘要：
本文旨在探讨下调潜伏相关核抗原(Latency-associated nuclear antigen,LANA)对卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma associated herpesvirus,KSHV)复制的影响.以四环素(Doxycycline,DOX)处理 KSHV 阳性的iSLK.219细胞,在不同时间点收集细胞,采用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,qPCR)检测裂解复制期LANA mRNA表达水平.采用脂质体法转染si-LANA至iSLK.219细胞中下调LANA表达水平,以转染非特异siRNA为对照,24h后加入DOX激活病毒裂解复制,在裂解复制激活后不同时间点收集细胞和培养液上清.采用台盼蓝染色法检测细胞活力,倒置荧光显微镜观察红色荧光蛋白(Red fluorescence protein,RFP)表达评价KSHV裂解复制水平;qPCR检测细胞内和上清液中KSHV基因组的拷贝数以判断病毒复制水平.诱导KSHV裂解复制后24h和48h LANA表达分别为潜伏期的2.2和2.6倍.敲低LANA后iSLK.219细胞裂解复制水平在24h、48h和72h比未敲低组分别下降了 8.18、3.25和3.98倍.敲低LANA细胞内病毒基因组拷贝数没有明显增加,而未敲低组在细胞内病毒基因组拷贝数在72h增加到2.1倍.相较于未敲低组,上清液中的病毒拷贝数在所有时间点均显著减少.对细胞活力的分析显示敲低LANA降低了细胞活力.敲低LANA抑制KSHV裂解复制,LANA可能通过维持细胞存活和增加细胞内病毒基因组拷贝数促进KSHV病毒的裂解复制.
文献关键词：
卡波氏肉瘤相关疱疹病毒;潜伏相关核抗原;裂解复制
中图分类号：
作者姓名：
章云衡;郑国霞;童恩煜;任艳丽;狄春红;杨磊;谭晓华
作者机构：
杭州师范大学公共卫生学院,杭州311121;杭州师范大学附属医院,杭州310015
文献出处：
引用格式：
[1]章云衡;郑国霞;童恩煜;任艳丽;狄春红;杨磊;谭晓华-.下调LANA对卡波氏肉瘤相关疱疹病毒复制的影响)[J].病毒学报,2022(05):1127-1134
A类：
LANA,卡波氏肉瘤相关疱疹病毒,潜伏相关核抗原,KSHV,Doxycycline,iSLK,裂解复制,裂解复制期
B类：
病毒复制,Latency,associated,nuclear,antigen,Kaposi,sarcoma,herpesvirus,四环素,DOX,不同时间点,点收,real,quantitative,qPCR,脂质体法,转染,非特异,siRNA,24h,活病毒,病毒裂解,培养液,台盼蓝,蓝染,染色法,细胞活力,倒置,荧光显微镜观察,红色荧光蛋白,Red,fluorescence,protein,RFP,复制水平,上清液,48h,潜伏期,敲低,72h,别下,病毒基因组,基因组拷贝数,细胞存活,加细
AB值：
0.199766
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