典型文献
LC3蛋白敲除A549细胞系的构建及其对流感病毒复制的影响
文献摘要：
微管相关蛋白1轻链3(LC3)是一种在流感病毒感染过程中被病毒M2蛋白招募至细胞膜处聚集的宿主细胞自噬相关蛋白.为了解其在流感病毒感染过程中行使的功能,利用CRISPR/Cas9技术构建LC3蛋白缺失细胞系,用以观察病毒生长复制的差异.设计sgRNA并插入至核心载体LentiCRISPRv2中,与辅助质粒共同转染293T细胞行慢病毒的包装.包装完成后用以感染A549细胞并进行嘌呤霉素压力筛选,对存活细胞的LC3蛋白含量进行检测,结果显示具有嘌吟抗性的细胞中未检测到LC3蛋白条带,LC3敲除细胞系构建成功.运用核染色法对比敲除细胞和正常细胞的细胞活性,发现缺失LC3蛋白细胞活性小幅度下降.流感病毒感染两种细胞绘制生长曲线,缺少LC3蛋白的条件下病毒复制水平下降.本研究构建的LC3蛋白缺失细胞系能够为将来研究LC3蛋白在细胞自噬与病毒感染过程中发挥功能,以及分子机制的研究提供了良好的细胞模型.
文献关键词：
LC3蛋白;敲除细胞系;流感病毒;感染
中图分类号：
作者姓名：
陆晨阳;包旦奇;马天馨;牛世奇;张婷;任超超;李雪松;杨健美;滕巧泱;李泽君;刘芹防
作者机构：
中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241
文献出处：
引用格式：
[1]陆晨阳;包旦奇;马天馨;牛世奇;张婷;任超超;李雪松;杨健美;滕巧泱;李泽君;刘芹防-.LC3蛋白敲除A549细胞系的构建及其对流感病毒复制的影响)[J].中国动物传染病学报,2022(03):7-12
A类：
B类：
LC3,A549,病毒复制,微管,轻链,流感病毒感染,M2,招募,细胞膜,宿主,主细胞,细胞自噬,自噬相关蛋白,中行,Cas9,技术构建,sgRNA,LentiCRISPRv2,质粒,转染,293T,慢病毒,装完,嘌呤霉素,压力筛,活细胞,蛋白含量,嘌吟,未检,白条,条带,敲除细胞系,染色法,细胞活性,小幅度,生长曲线,复制水平,研究构建,细胞模型
AB值：
0.357742
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