典型文献
一种噬菌体质粒的构建及其在抗体库模型筛选中的应用
文献摘要：
目的 噬菌体展示技术(Phage display technology,PDT)是一种独立于任何免疫系统并在体外进行筛选多肽或者抗体的一种技术,可以从噬菌体抗体库中筛选得到特异性结合的单克隆抗体(monoclonal antibody).本研究提出了一种应用于噬菌体抗体库筛选的质粒构建方法,旨在提高噬菌体展示技术的筛选效率.方法 首先将编码整个抗体结合域的基因(以单链可变片段scFv的形式)融合到基因Ⅲ,并在融合噬菌粒scFv-PⅢ间引入牛凝血酶(thrombin)酶切位点,通过SDS-PAGE及Western Blot实验验证牛凝血酶特异性洗脱效果,同时利用ELISA(酶联免疫吸附实验)及噬菌体滴度检测特异性洗脱后单链抗体的结合活性,最后根据该质粒设计一种新的模型筛选方法,验证筛选效率.结果 本研究成功构建目标质粒并利用该质粒进行模型筛选,证实筛选效率得到提高.结论 在构建噬菌体抗体库的噬菌粒载体上添加牛凝血酶特异性酶切位点的筛选方法,可以减少筛选轮次高效筛选出特异性噬菌体抗体.
文献关键词：
噬菌体展示;牛凝血酶;模型筛选
中图分类号：
作者姓名：
康晓彤;赵博
作者机构：
上海交通大学药学院,上海 200240
文献出处：
引用格式：
[1]康晓彤;赵博-.一种噬菌体质粒的构建及其在抗体库模型筛选中的应用)[J].石河子大学学报（自然科学版）,2022(05):604-610
A类：
牛凝血酶
B类：
模型筛选,选中,噬菌体展示技术,Phage,display,technology,PDT,免疫系统,多肽,噬菌体抗体库,选得,特异性结合,单克隆抗体,monoclonal,antibody,质粒构建,构建方法,筛选效率,scFv,合到,噬菌粒,thrombin,酶切位点,SDS,PAGE,Blot,洗脱,酶联免疫吸附实验,滴度,单链抗体,结合活性,筛选方法,构建目标,轮次,高效筛选
AB值：
0.299555
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