典型文献
甘薯块根cDNA酵母文库的构建及IbNCED3启动子互作蛋白的筛选鉴定
文献摘要：
[目的]橘心甘薯和黄心甘薯富含大量合成维生素A的前体物质-β-胡萝卜素.9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶(9?Cis Epoxycarote-noid Dioxygenase,NCED)可降解植物中的类胡萝卜素,与脱落酸(Abscisic Acid,ABA)的合成和抗逆性相关.本研究通过构建甘薯块根cDNA酵母文库并利用酵母单杂交(Yeast One-Hybrid,Y1H)技术筛选与IbNCED3基因启动子互作的调控因子,为深入研究IbNCED3的功能和表达调控机制奠定基础.[方法]利用Gateway技术构建甘薯块根cDNA酵母文库,根据'徐薯18'基因组数据克隆IbNCED3的启动子序列,并利用双酶切方法构建诱饵载体pAbAi-NCED3.利用同源重组的方法,将诱饵载体整合到Y1HGold菌株中.利用所构建的甘薯块根cD-NA酵母文库和诱饵载体pAbAi-NCED3筛选与IbNCED3启动子互作的蛋白,并通过酵母单杂交技术进行验证.[结果]成功构建了甘薯块根cDNA酵母文库,文库的容量达到1.1×107以上,重组率为100％,插入片段的大小为600～2500 bp.克隆得到的IbNCED3启动子区存在4个核心启动区域,选取其中的3和4(-311～-86)区域序列作为诱饵序列成功构建诱饵载体pAbAi-NCED3,利用该载体筛选并验证获得与IbNCED3启动子互作的3个蛋白,分别为胁迫相关的DnaJ蛋白、开花相关的FRIGIDA-Like蛋白和功能未知蛋白.[结论]构建的甘薯块根cDNA酵母文库质量较高,可用于通过酵母单杂交和酵母双杂交(Yeast Two-Hybrid,Y2H)筛选互作蛋白.以IbNCED3启动子为诱饵,在所构建的甘薯块根cDNA酵母文库中筛选到3个与其互作的蛋白.
文献关键词：
甘薯;酵母cDNA文库;酵母单杂交;互作蛋白;IbNCED3
中图分类号：
作者姓名：
赵彩良;张洁;唐锐敏;贾小云
作者机构：
山西农业大学 农学院,山西 晋中 030801;山西农业大学 生命科学学院,山西 晋中 030801
文献出处：
引用格式：
[1]赵彩良;张洁;唐锐敏;贾小云-.甘薯块根cDNA酵母文库的构建及IbNCED3启动子互作蛋白的筛选鉴定)[J].山西农业大学学报（自然科学版）,2022(04):19-27
A类：
IbNCED3,Epoxycarote,Dioxygenase,Y1HGold,FRIGIDA
B类：
甘薯块根,cDNA,母文,文库,互作蛋白,筛选鉴定,心甘,黄心,前体物质,顺式,类胡萝卜素,加氧酶,Cis,noid,可降解,脱落酸,Abscisic,Acid,ABA,抗逆性,酵母单杂交,Yeast,One,Hybrid,技术筛选,基因启动子,调控因子,表达调控,调控机制,Gateway,技术构建,基因组数据,启动子序列,双酶,诱饵载体,pAbAi,同源重组,合到,杂交技术,bp,启动子区,列作,列成,胁迫,DnaJ,开花,Like,酵母双杂交,Two,Y2H
AB值：
0.249359
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
