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猪胸膜肺炎放线杆菌细胞毒素ApxⅡ在谷氨酸棒杆菌中的截短表达
文献摘要：
猪胸膜肺炎放线杆菌细胞毒素ApxⅡ(Actinobacillus.pleuropneumoniae toxin,Apx)作为亚单位疫苗可较好抵抗养猪业五大疾病之一的猪胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia,PCP).谷氨酸棒杆菌(C.glutamicum)是食品级安全微生物,疫苗蛋白表达潜力巨大.为实现重组ApxⅡ在谷氨酸棒杆菌中分泌表达,截取全长ApxⅡ中抗原表位序列获得ApxⅡ截短片段(ApxⅡ#5)并将其构建至谷氨酸棒杆菌表达载体pXMJ19中表达.为进一步提升ApxⅡ分泌表达水平,优化ApxⅡ表达盒中启动子和信号肽元件.结果表明,全长ApxⅡ未在谷氨酸棒杆菌中表达,截短ApxⅡ可在其中分泌表达.为进一步提高产量,通过启动子筛选,选用诱导型启动子tac,其表达强度为全合成启动子H36的1.58倍;通过信号肽筛选,选用CspB信号肽,其分泌表达强度为对照组CgR0949信号肽的5.48倍.在谷氨酸棒杆菌中表达截短ApxⅡ摇瓶水平产量达到51.1 mg·L-1,可与猪抗ApxⅡ阳性血清特异性免疫.研究结果可为兽用疫苗产业提供质量可靠、低成本表达体系.
文献关键词：
谷氨酸棒杆菌;ApxⅡ;截短表达;启动子;信号肽
中图分类号：
作者姓名：
杨术杰;孙曼曼;刘秀霞;杨艳坤;白仲虎
作者机构：
江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心,江苏 无锡 214122;江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122;江苏省生物活性制品加工工程技术研究中心,江苏 无锡 214122
文献出处：
引用格式：
[1]杨术杰;孙曼曼;刘秀霞;杨艳坤;白仲虎-.猪胸膜肺炎放线杆菌细胞毒素ApxⅡ在谷氨酸棒杆菌中的截短表达)[J].东北农业大学学报,2022(04):49-58
A类：
Apx,pleuropneumoniae,pleuropneumonia,pXMJ19,tac,H36,CspB,CgR0949
B类：
胸膜肺炎放线杆菌,细胞毒,谷氨酸棒杆菌,截短表达,Actinobacillus,toxin,亚单位疫苗,养猪业,Porcine,contagious,PCP,glutamicum,食品级,分泌表达,截取,全长,抗原表位,短片,#5,表达载体,表达盒,信号肽,未在,提高产量,诱导型启动子,全合成,肽筛选,摇瓶,平产,阳性血清,特异性免疫,兽用疫苗,疫苗产业,本表,表达体系
AB值：
0.262543
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