典型文献
miR-19b在人主动脉瓣间质细胞钙化中的作用
文献摘要：
目的 探讨miR-19b在人主动脉瓣间质细胞(hVIC)钙化中的作用和机制.方法 使用含骨形态发生蛋白2(BMP-2)、地塞米松、抗维生素C和β-甘油磷酸的钙化培养液诱导hVIC细胞钙化(钙化模型组),通过Von Kossa染色鉴定模型是否构建成功,以未做处理的hVIC细胞作为对照组.根据转染质粒的不同,将hVIC细胞分为miR-19b空白对照(miR-NC)组、miR-19b过表达组、SMAD4过表达组、miR-19b和SMAD4同时过表达(miR-19b+SMAD4过表达)组.采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测各组hVIC细胞miR-19b、转录受体相关转录因子-2(RUNX2)mRNA、骨钙素(OC)mRNA、SMAD1 mRNA、骨桥蛋白(OPN)mRNA和SMAD4 mRNA的相对表达量.采用免疫印迹法检测SMAD4蛋白的相对表达量.采用StarBase数据库预测miR-19b的下游靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验进行验证.结果 钙化诱导后的hVIC细胞互相重叠生长,并表现出明显的聚集样生长趋势,细胞内钙化结节的数目明显增多(P<0.05),成骨相关因子RUNX2 mRNA、OC mRNA、SMAD1 mRNA和OPN mRNA的相对表达量明显升高(P<0.05).钙化模型组miR-19b表达下调(P<0.05).过表达miR-19b后hVIC细胞内RUNX2 mRNA、OC mRNA、SMAD1 mRNA和OPN mRNA相对表达量显著降低(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验结果证实SMAD4是miR-19b的下游靶基因.过表达SMAD4后hVIC细胞内RUNX2 mRNA、OC mRNA、SMAD1 mRNA和OPN mRNA相对表达量显著上调(P<0.05),同时过表达miR-19b和SMAD4的hVIC细胞内成骨相关因子表达无变化(P>0.05).结论 hVIC细胞钙化模型中miR-19b表达显著下调.miR-19b通过与下游靶基因SMAD4的靶向结合调控hVIC的钙化.miR-19b和SMAD4或可作为治疗主动脉瓣钙化疾病的潜在治疗靶标.
文献关键词：
miR-19b;主动脉瓣间质细胞钙化;成骨分化
中图分类号：
作者姓名：
杨濛;丁辉
作者机构：
西北大学附属医院 西安市第三医院心血管内科,陕西 西安 710018
文献出处：
引用格式：
[1]杨濛;丁辉-.miR-19b在人主动脉瓣间质细胞钙化中的作用)[J].检验医学,2022(05):466-471
A类：
主动脉瓣间质细胞钙化,hVIC,19b+SMAD4
B类：
miR,骨形态发生蛋白,BMP,地塞米松,培养液,Von,Kossa,定模,转染,质粒,空白对照,NC,过表达,荧光定量聚合酶链反应,RUNX2,骨钙素,OC,SMAD1,骨桥蛋白,OPN,相对表达量,免疫印迹法,StarBase,靶基因,双荧光素酶报告基因实验,生长趋势,细胞内钙,钙化结节,成骨相关因子表达,主动脉瓣钙化,潜在治疗,靶标,成骨分化
AB值：
0.142832
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