典型文献
过/降表达miR-20a-5p的骨肉瘤细胞增殖、侵袭能力及Bax、Bcl-2、E2F5蛋白表达观察
文献摘要：
目的 观察miR-20a-5p在骨肉瘤(OS)细胞中的表达变化,探讨miR-20a-5p表达对OS细胞增殖、凋亡及侵袭的影响及其分子机制.方法 采用实时荧光定量PCR法检测正常人成骨细胞系hFOB1.19及OS细胞系(U-20S、143B、Saos-2)中的miR-20a-5p表达量.将OS细胞系143B随机分为miR-20a-5p过表达组、miR-20a-5p抑制表达组及阴性对照组,通过LipofectamineTM3000分别转染miR-20a-5p mimics、miR-20a-5p inhibit及scramble,转染24 h.采用CCK-8法检测三组培养0、24、48、72 h的的光密度值(OD值),流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell小室实验检测侵袭细胞数.在线数据库TargetScan预测结果显示E2F转录因子5(E2F5)存在与miR-20a-5p结合的潜在靶点,荧光素酶报告基因实验证实miR-20a-5p的靶基因为E2F5,采用Westen blotting法检测细胞Bax、Bcl-2、E2F5蛋白表达.结果 OS细胞系U-20S、143B、Saos-2中miR-20a-5p相对表达量分别为1.94±0.35、1.05±0.13、0.35±0.06,均明显低于正常人成骨细胞系hFOB1.19中的3.89±0.53(P均<0.05).随着培养时间的延长,三组OD值均呈升高趋势;培养24、48、72 h,相同培养时间下miR-20a-5p过表达组、阴性对照组、miR-20a-5p抑制表达组OD值依次升高,组间两两比较P均<0.05.miR-20a-5p过表达组、阴性对照组、miR-20a-5p抑制表达组细胞凋亡率、Bax蛋白相对表达量均依次降低,侵袭细胞数、Bcl-2、E2F5蛋白相对表达量均依次升高,组间两两比较P均<0.05.结论 miR-20a-5p在OS细胞系中表达下调,过表达miR-20a-5p可抑制OS细胞增殖、侵袭并诱导细胞凋亡,其机制可能与下调E2F5、Bcl-2及上调Bax蛋白表达有关,降表达miR-20a-5p则具有相反的作用.
文献关键词：
骨肉瘤;miR-20a-5p;细胞增殖;细胞凋亡;细胞侵袭;E2F5
中图分类号：
作者姓名：
郭会;方艳君;李翠娥;段祥林
作者机构：
协和武汉红十字会医院骨科,武汉430000
文献出处：
引用格式：
[1]郭会;方艳君;李翠娥;段祥林-.过/降表达miR-20a-5p的骨肉瘤细胞增殖、侵袭能力及Bax、Bcl-2、E2F5蛋白表达观察)[J].山东医药,2022(11):42-46
A类：
LipofectamineTM3000
B类：
miR,20a,5p,骨肉瘤细胞,侵袭能力,Bax,Bcl,E2F5,达观,OS,表达变化,正常人,人成骨细胞,细胞系,hFOB1,20S,143B,Saos,过表达,制表,转染,mimics,inhibit,scramble,CCK,组培,光密度值,OD,流式细胞术,细胞凋亡率,Transwell,小室,实验检测,TargetScan,潜在靶点,荧光素酶报告基因实验,靶基因,Westen,blotting,相对表达量,低于正常,培养时间,白相,均依,可抑制,细胞侵袭
AB值：
0.211677
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