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miR-375靶向锌指蛋白470对人牙周膜干细胞成软骨分化的调控作用
文献摘要：
目的 探讨miR-375靶向锌指蛋白470(ZNF470)对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)成软骨分化的调控作用.方法 以诱导成软骨分化培养基诱导hPDLSCs成软骨分化,实时荧光定量PCR法检测成软骨分化诱导1、3、7、14、21 d时miR-375及ZNF470 mRNA的表达,双荧光素酶报告基因检测法分析miR-375与ZNF470的靶向调控关系.将hPDLSCs分为空白对照组、阴性对照组、miR-375过表达组、对照+空载组、miR-375过表达+空载组及miR-375过表达+ZNF470组,分别转染对照激动剂(NC-ago)、miR-375突变激动剂(miR-375-mut-ago)、miR-375激动剂(miR-375-ago)、NC-ago+空载、miR-375-ago+空载以及miR-375-ago+ZNF470载体,转染后对各组细胞进行成软骨分化诱导.采用阿尔新蓝染色观察各组成软骨分化情况,实时荧光定量PCR与Western blotting分别检测软骨标志性基因Ⅱ型胶原α1(COL2A1)、性别决定基因9(SOX9)、软骨可聚蛋白多糖(ACAN)以及透明质酸合酶2(HAS2)的mRNA与蛋白表达水平.结果 诱导hPDLSCs成软骨分化过程中miR-375 mRNA表达呈时间依赖性下调,ZNF470 mRNA表达呈时间依赖性上调,miR-375与ZNF470表达呈负相关(r=-0.47,P<0.05).双荧光素酶报告基因显示,miR-375可靶向负调控ZNF470.阿尔新蓝染色显示,成软骨分化程度miR-375过表达组<空白对照组、阴性对照组,miR-375过表达+空载组
文献关键词：
miR-375;人牙周膜干细胞;成软骨分化;锌指蛋白470;靶点
中图分类号：
作者姓名：
王艳华;袁淑静;潘裕兴;华烨;李世英;王天
作者机构：
天津市人民医院口腔科,天津300121
文献出处：
引用格式：
[1]王艳华;袁淑静;潘裕兴;华烨;李世英;王天-.miR-375靶向锌指蛋白470对人牙周膜干细胞成软骨分化的调控作用)[J].山东医药,2022(17):28-32
A类：
ZNF470,+ZNF470,ago+,ago+ZNF470
B类：
miR,锌指蛋白,人牙周膜干细胞,成软骨分化,hPDLSCs,分化培养,分化诱导,双荧光素酶报告基因,基因检测,检测法,靶向调控,空白对照,过表达,空载,转染,激动剂,NC,mut,蓝染,blotting,COL2A1,性别决定基因,SOX9,ACAN,透明质酸,HAS2,蛋白表达水平,时间依赖性,负调控,分化程度,基因表达差异,分子靶点
AB值：
0.124576
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