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柱前衍生-超高效液相色谱法测定母乳中16种氨基酸的含量
文献摘要：
以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)进行柱前衍生,以超高效液相色谱法测定了人初乳、过渡乳、成熟乳中的苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、酪氨酸、甘氨酸、谷氨酸、丝氨酸和牛磺酸等16种氨基酸的含量,并与GB 5009.124-2016中氨基酸分析法(GB法)的测定结果进行对比.取解冻后的母乳0.22 mL,加入水、氢氧化钠溶液、盐酸溶液、L-正缬氨酸内标溶液和含0.1％(体积分数)苯酚的盐酸溶液,氮吹5 s,涡旋混匀后,于110℃水解(24±0.5)h.从液面下1 cm处取0.2 mL水解样品,加入氢氧化钠溶液和盐酸溶液,涡旋后过0.2μm尼龙滤膜.取上述滤液10μL,用AQC衍生试剂衍生,于55℃加热10 min,按照优化的仪器工作条件测定.在ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱上进行梯度洗脱分离,在检测波长260 nm处检测,内标法定量.结果显示,16种氨基酸标准曲线的线性范围为0.5～25μmol·L-1,检出限(3s)为2.5～10.7 mg·L-1.对实际样品进行3个浓度水平的加标回收试验,回收率为95.0％～108％,测定值的相对标准偏差(n=6)均不大于9.0％.方法用于不同泌乳阶段母乳的分析,除了过渡乳和成熟乳中的组氨酸外,所得其他母乳中的氨基酸的测定值均显著高于GB法的(P<0.05),推测与前处理方法、仪器、取样量等的差异有关,具体原因还待进一步研究.
文献关键词：
柱前衍生;超高效液相色谱法;氨基酸;母乳;方法比对
中图分类号：
作者姓名：
李娜;田芳;曲栗;钱昌丽;高琴;韩丽;赵艳荣;王玉
作者机构：
兰州大学 公共卫生学院,兰州 730000;雅培营养中国研发中心,上海 200233;上海海关 动植物与食品检验检疫技术中心,上海 200135
文献出处：
引用格式：
[1]李娜;田芳;曲栗;钱昌丽;高琴;韩丽;赵艳荣;王玉-.柱前衍生-超高效液相色谱法测定母乳中16种氨基酸的含量)[J].理化检验-化学分册,2022(11):1328-1334
A类：
B类：
柱前衍生,超高效液相色谱法,母乳,喹啉,琥珀,酰亚胺,胺基,氨基甲酸酯,AQC,初乳,过渡乳,成熟乳,苏氨酸,缬氨酸,异亮氨酸,苯丙氨酸,组氨酸,赖氨酸,精氨酸,天冬氨酸,脯氨酸,酪氨酸,甘氨酸,谷氨酸,丝氨酸,和牛,牛磺酸,氨基酸分析法,测定结果,解冻,氢氧化钠溶液,盐酸溶液,苯酚,涡旋,混匀,液面,尼龙,滤膜,滤液,试剂衍生,工作条件,ACQUITY,UPLC,BEH,C18,色谱柱,梯度洗脱,内标法定量,标准曲线,线性范围,检出限,3s,浓度水平,加标回收,回收试验,测定值,相对标准偏差,泌乳阶段,前处理方法,取样量,具体原因,方法比对
AB值：
0.355665
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