典型文献
山羊DGAT1基因的克隆及对前体脂肪细胞脂质沉积的调控作用研究
文献摘要：
旨在克隆山羊DGAT1基因序列,明确DGAT1基因在山羊不同组织中的表达模式,并进一步揭示过表达DGA T1基因对山羊肌内前体脂肪细胞脂质代谢的影响.本试验以10月龄健康简州大耳公羊(n=7)为试验动物.采用RT-PCR法克隆山羊DGAT1基因序列,并对序列进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测DGA T1在山羊不同组织中的相对表达水平;采用双酶切法构建pcDNA3.1-DGAT1真核表达载体并转染至山羊肌内前体脂肪细胞;使用RT-qPCR检测DGA T1过表达效率及脂质代谢相关基因的表达情况;通过油红O染色法观察过表达DGAT1对脂滴形成的影响,利用GPO-Trinder酶学反应检测甘油三酯含量.结果 显示,获得山羊DGA T1基因序列全长1651 bp(GenBank登录号:MT221183),包含5 'UTR 125 bp,CDS 1470 bp,3'UTR 56 bp,编码489个氨基酸残基;山羊DGAT1基因在小肠中的表达量最高,在脾中表达量最低;RT-qPCR检测结果显示,DGA T1在细胞中过表达极显著(P＜0.01),GPAM基因的相对表达水平显著上调(P＜0.05),ADRP和ACOX1基因极显著上调(P＜0.01),而AGPA T6基因相对表达水平显著下调(P＜0.05),MLYCD和HSL基因极显著下调(P＜0.01);油红O染色结果显示,过表达DGA T1后脂滴聚积相较于对照组极显著增多(P＜0.01),甘油三酯测定结果显示,过表达DGAT1基因可极显著增加山羊肌内脂肪细胞甘油三酯含量(P＜0.01).本研究成功获得山羊DGAT1基因CDS区序列并构建了pcDNA3.1-DGAT1真核表达载体,过表达DGAT1可显著促进山羊肌内前体脂肪细胞脂质沉积,并显著影响脂质代谢相关基因的表达,这些结果为进一步阐明DGAT1对调控山羊肌内脂肪代谢的作用机制提供了重要数据.
文献关键词：
山羊;DGAT1;过表达;肌内前体脂肪细胞;甘油三酯
中图分类号：
作者姓名：
杨昌恒;李琪;黄维;林亚秋;王永;向华;朱江江
作者机构：
西南民族大学青藏高原研究院,成都610041;青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部/四川省重点实验室,成都610041
文献出处：
引用格式：
[1]杨昌恒;李琪;黄维;林亚秋;王永;向华;朱江江-.山羊DGAT1基因的克隆及对前体脂肪细胞脂质沉积的调控作用研究)[J].畜牧兽医学报,2022(01):76-87
A类：
Trinder,MT221183,AGPA,MLYCD
B类：
山羊,DGAT1,脂质沉积,基因序列,不同组织,表达模式,过表达,肌内前体脂肪细胞,月龄,公羊,试验动物,生物信息学分析,real,quantitative,qPCR,相对表达,双酶,pcDNA3,真核表达载体,转染,表达效率,脂质代谢相关基因,过油,染色法,脂滴,GPO,酶学,甘油三酯,全长,bp,GenBank,登录号,UTR,CDS,氨基酸残基,小肠,GPAM,ADRP,ACOX1,T6,HSL,染色结果,聚积,测定结果,肌内脂肪细胞,进山,脂肪代谢,重要数据
AB值：
0.234178
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