旨在克隆牦牛甲基转移酶样蛋白(methyltransferase-like protein 14,METTL14)基因的编码区(CDS)序列,探究其分子特征及时空表达规律.以大通牦牛脂肪组织cDNA为模板,通过克隆获得METTL14的完整CDS区序列,用生物学软件进行基因序列和蛋白质结构分析,利用qRT-PCR检测METTL14的时空表达规律.结果显示,大通牦牛METTL14的CDS区全长1 371 bp,共编码456个氨基酸;METTL14亲缘关系与野牦牛最近,与鸡和小鼠最远;氨基酸等电点是5.89,不稳定系数(Ⅱ)为52.02,GRAVY=-0.878,METTL14总体表现出强的亲水性;MET-TL14 有1个大小为177 aa的MT-A70酶保守结构域,无信号肽与跨膜结构域;亚细胞定位与核定位预测分析都显示METTL14位于细胞核(69.60％).推测METTL14共有40个潜在的磷酸化位点.METTL14蛋白高级结构由无规则卷曲(51.10％)、α-螺旋(33.11％)、延伸链(11.84％)和β-转角(3.95％)相互连接而成.METTL14与甲基化修饰相关蛋白相互作用,主要参与RNA甲基化修饰过程.qRT-PCR结果显示,METTL14基因在牦牛7个组织中均有表达,相比脂肪组织中的表达,背最长肌中表达量最高(P＜0.001);在牦牛生长发育的不同阶段,前体脂肪细胞中METTL14的表达量也有差异,30月龄＞18月龄(P＜0.05);进一步研究发现,在牦牛前体脂肪细胞分化过程中,METTL14表达量在0,4,8,12 d呈现上升的趋势,在4,8 d的表达量显著高于0 d(P＜0.05),12 d的表达量极显著高于0d(P＜0.01).结果表明,大通牦牛METTL14是一个具有MT-A70酶保守结构域的定位在细胞核上的酸性不稳定水溶性蛋白,在牦牛脂肪沉积过程中发挥着重要的作用.本试验进一步为METTL14在牦牛脂肪沉积中的调控机制研究奠定理论基础.

大通牦牛;甲基转移酶样蛋白14;生信分析;时空表达规律

马兰花;顾亚荣;张永峰;潘和平;阎萍

西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730030;中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所甘肃省牦牛繁育工程重点实验室,甘肃兰州730030

中国兽医学报

[1]马兰花;顾亚荣;张永峰;潘和平;阎萍-.牦牛METTL14 CDS区克隆及表达谱分析)[J].中国兽医学报,2022(05):962-972,980

TL14,A70

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