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海洋杆菌糖基转移酶Agt突变体的制备及其在单葡萄糖甘油二酯催化合成中的应用
文献摘要：
甘油糖脂由糖与甘油脂通过糖苷键连接而成,具有抗肿瘤、抗病毒和抗炎等多种生物活性,已成为当前研究的热点.目前获得甘油糖脂的方法包括植物提取法及化学合成法.植物提取法提取率及纯度较低;化学合成法对反应条件和分离设备要求高,产品不易分离,产生的废液污染环境.该研究采用基因工程方法构建海洋杆菌Candidatus pelagibacter sp.HTCC7211中的糖基转移酶Agt高活性突变体重组质粒,实现在大肠杆菌E.coli BL21-CodonPlus(DE3)-RIL中的表达,进一步研究其酶活性,优化催化合成单葡萄糖甘油二酯的最佳反应条件及其提取方法.结果表明:构建的突变体T257 S可将二磷酸尿苷-葡萄糖(uridine diphosphate gluscose,UDP-Glu)和甘油二酯高效地转化为单葡萄糖甘油二酯,其催化效率是野生型合成酶Agt的1.56倍;采用环己烷/乙酸乙酯法提取单葡萄糖甘油二酯,最高提取率达84.7％;在最佳反应条件酶浓度8 U/mL、UDP-Glu质量浓度500 mg/L、温度35℃和pH 8.5条件下,转化率和纯度分别达68.5％和93.8％.因此利用突变体T257S制备单葡萄糖甘油二酯具有转化率高、产物纯度高和合成步骤较少等优势,具有良好的工业应用前景.
文献关键词：
糖基转移酶Agt;单葡萄糖甘油二酯;突变体T257S;分离提取
中图分类号：
作者姓名：
张志平;赵雨哲;赵彩梦;杨旭;魏涛
作者机构：
郑州轻工业大学食品与生物工程学院,河南郑州450001
文献出处：
引用格式：
[1]张志平;赵雨哲;赵彩梦;杨旭;魏涛-.海洋杆菌糖基转移酶Agt突变体的制备及其在单葡萄糖甘油二酯催化合成中的应用)[J].食品与发酵工业,2022(13):9-15
A类：
单葡萄糖甘油二酯,pelagibacter,HTCC7211,CodonPlus,T257,gluscose,T257S
B类：
糖基转移酶,Agt,突变体,催化合成,糖脂,油脂,糖苷键,键连接,抗病毒,植物提取,提取法,化学合成法,反应条件,备要,废液,污染环境,基因工程,Candidatus,高活性,重组质粒,大肠杆菌,coli,BL21,DE3,RIL,成单,二磷酸,尿苷,uridine,diphosphate,UDP,Glu,催化效率,野生型,合成酶,环己烷,乙酸乙酯,高提取率,工业应用,分离提取
AB值：
0.258949
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