典型文献
转录因子GRHL3调控GPR108基因表达及其作用机制
文献摘要:
目的 研究转录因子果蝇头状因子(grainyhead-like,GRHL)3调控G蛋白偶联受体108(G protein-coupled receptor 108,GPR108)表达的分子机制.方法 利用生物信息学分析在各种癌症组织的肿瘤细胞中,GRHL3和GPR108的表达水平以及相互关系;运用反转录定量聚合酶链反应(reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测GRHL3和GPR108基因在人皮肤鳞癌细胞系(A-431)、人肝癌细胞系(Hep G2)以及人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)的表达;采用分子克隆技术构建含有GPR108基因启动子和突变型GPR108基因启动子的荧光素酶报告基因表达载体;通过双荧光素酶报告基因检测系统,观察GRHL3对GPR108基因启动子的调控作用;通过染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation assay,ChIP)分析GRHL3和GPR108启动子结合位点之间的关系.结果 生物信息学分析在各种组织的肿瘤细胞中,GRHL3的表达较低,而GPR108的表达较高.利用分子克隆技术成功构建了GPR108基因启动子和突变型GPR108基因启动子荧光素酶报告基因表达载体;GRHL3对荧光素酶报告基因GPR108的启动子具有明显的抑制作用.将GPR108启动子上的结合位点删除突变后,GRHL3对GPR108基因启动子的负调控作用减弱;ChIP结果显示GRHL3能与GPR108启动子结合位点结合.结论 转录因子GRHL3通过结合GPR108启动子上的保守序列5′-AACCGGTG-3′抑制GPR108表达.
文献关键词:
果蝇头状因子3;G蛋白偶联受体108;启动子
中图分类号:
作者姓名:
倪鸣岳;刘源立;涂珍珍;郭立钰;臧丹丹;周海胜
作者机构:
安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,合肥230032;安徽医科大学科研实验中心,合肥230032
文献出处:
引用格式:
[1]倪鸣岳;刘源立;涂珍珍;郭立钰;臧丹丹;周海胜-.转录因子GRHL3调控GPR108基因表达及其作用机制)[J].首都医科大学学报,2022(03):446-455
A类:
GPR108,grainyhead,GRHL,AACCGGTG
B类:
GRHL3,子果,果蝇,蝇头,头状,like,偶联,protein,coupled,receptor,利用生物,生物信息学分析,癌症组,肿瘤细胞,定量聚合酶链反应,reverse,transcription,quantitative,polymerase,chain,reaction,qPCR,人皮,皮肤鳞癌,细胞系,人肝癌细胞,Hep,G2,人神经母细胞瘤细胞,SH,SY5Y,分子克隆,克隆技术,技术构建,基因启动子,突变型,表达载体,双荧光素酶报告基因,基因检测,染色质免疫共沉淀,chromatin,immunoprecipitation,assay,ChIP,结合位点,删除,负调控,保守序列
AB值:
0.234414
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