目的 探讨微RNA(miRNA)-185-5 p通过调控酪氨酸3/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白(YWHAZ)对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549增殖、侵袭凋亡和上皮间质转化的影响.方法 获取GSE152702数据集,识别在NSCLC患者和健康者血液中差异性表达的miRNA,收集2018年7月至2019年9月在浙江大学附属第二医院确诊为NSCLC患者的癌组织及癌旁组织,使用RT-qPCR法检测miRNA-185-5p在NSCLC癌组织和细胞系中的表达情况.采用脂质体转染法,分别将miRNA-NC、miRNA-185-5p模拟物、miRNA-185-5p抑制剂和miRNA-185-5p模拟物+pcDNA3.0-YWHAZ转染至人NSCLC细胞A549中,Tr-answell实验检测各组A549细胞的侵袭能力,CCK-8实验检测各组A549细胞的增殖能力,脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)检测各组A549细胞的凋亡率,Western blot实验检测各组细胞中YWHAZ和上皮间质转化相关蛋白E-cadherin和Vimentin的表达情况.检索StarBase、Targetscan和Hu-man protein Atlas数据库,韦恩图绘制与miRNA-185-5p含潜在互补结合位点及与NSCLC患者预后不良有关的基因.检索GEPIA数据库识别YWHAZ表达与肺鳞癌、肺腺癌患者预后的关系.生物学信息技术预测和双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-185-5p和YWHAZ之间的关系.结果 GSE152702数据集显示miR-NA-185-5p在NSCLC患者中明显下调,miRNA-185-5p在NSCLC癌组织中的表达水平低于癌旁组织(P<0.01).miRNA-185-5p在NSCLC细胞株中的表达水平低于正常人肺上皮细胞株(P<0.05),与miRNA-NC组比较,miRNA-185-5p模拟物组miRNA-185-5p表达水平明显升高(P<0.05),YWHAZ表达水平明显降低(P<0.01),miRNA-185-5p抑制剂组中miRNA-185-5p表达水平明显降低(P<0.05),YWHAZ表达水平明显升高(P<0.01).过表达miRNA-185-5p能明显抑制A549细胞增殖、侵袭和上皮间质转化,并促进细胞凋亡(P<0.05).GEPIA数据库显示,YWHAZ在肺鳞癌和肺腺癌患者中明显上调,且与患者预后不良有关.YWHAZ可与miRNA-185-5p靶向结合,过表达YWHAZ可部分逆转miRNA-185-5p模拟物对A549细胞增殖,侵袭和上皮间质转化的抑制作用,以及对细胞凋亡的促进作用.结论 miRNA-185-5p在NSCLC癌组织及细胞中明显下调,过表达miRNA-185-5p能明显抑制A549细胞增殖、侵袭和上皮间质转化的能力,并促进细胞凋亡,其机制可能与调控YWHAZ的表达有关.

非小细胞肺癌;微RNA-185-5 p;侵袭;上皮间质转化;酪氨酸3/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白

李奇炯;颜伏归

浙江大学附属第二医院呼吸与危重医学科,杭州 310000;浙江大学临床医学系,杭州 310058

重庆医学

[1]李奇炯;颜伏归-.miRNA-185-5p通过靶向YWHAZ对人非小细胞肺癌细胞A549恶性生物学行为的影响)[J].重庆医学,2022(15):2525-2531

GSE152702

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