目的 观察脯氨酸羟化酶抑制剂FG-4592对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞炎症反应的影响,并探讨其分子机制.方法 ①星形胶质细胞C8-D1A分为细胞对照组和FG-4592(10,20和40μmol·L-1)组,药物处理6 h后,采用CCK-8法检测细胞存活率,Western印迹法检测低氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达水平,实时定量多聚酶链反应(RT-qPCR)检测葡萄糖转运蛋白1(Glut1)、血管内皮生长因子(VEGF)和促红细胞生成素(EPO)mRNA表达水平.②C8-D1A细胞分为细胞对照组、FG-4592组(FG-459240μmol·L-1处理7 h)、LPS模型组(LPS 100μg·L-1处理6 h)和LPS+FG-4592组(FG-459210,20和40μmol·L-1预处理1 h后加入LPS 100μg·L-1共同处理6 h),采用RT-qPCR检测白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平.③原代小鼠星形胶质细胞分组和处理同②,LPS+FG-4592组FG-4592剂量为40μmol·L-1,采用Western印迹法检测HIF-1α蛋白表达水平,RT-qPCR检测HIF-1α,IL-6,IL-1β和TNF-αmRNA表达水平.④C8-D1A细胞分组和处理同③,Western印迹法检测Toll样受体4(TLR4)、磷酸化NF-κB抑制因子α(p-IκBα)和p-P65蛋白表达水平.结果 ①与细胞对照组相比,FG-459210,20和40μmol·L-1组C8-D1A细胞存活率无显著差异,HIF-1α蛋白水平显著上升(P<0.01),Glut1,VEGF和EPO mRNA水平显著上升(P<0.05,P<0.01).②与细胞对照组相比,LPS模型组C8-D1A细胞IL-6,IL-1β和TNF-αmRNA表达水平显著上升(P<0.01);与LPS模型组相比,LPS+FG-4592组IL-6,IL-1β和TNF-αmRNA表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01).③与细胞对照组相比,FG-4592组和LPS+FG-4592组原代小鼠星形胶质细胞HIF-1α蛋白水平显著上升(P<0.01),HIF-1αmRNA水平无显著差异;LPS模型组原代小鼠星形胶质细胞IL-6,IL-1β和TNF-αmRNA表达水平显著上升(P<0.01).与LPS模型组相比,LPS+FG-4592组原代小鼠星形胶质细胞IL-6,IL-1β和TNF-αmRNA表达水平显著下降(P<0.01).④ 与细胞对照组相比,LPS模型组C8-D1A细胞TLR4,p-IκBα和p-P65蛋白表达水平上升(P<0.05,P<0.01);与LPS模型组相比,LPS+FG-4592组TLR4,p-IκBα和p-P65蛋白水平下降(P<0.05,P<0.01).结论 FG-4592能激活星形胶质细胞HIF-1信号通路,并抑制LPS诱导的炎症反应,其机制可能与抑制NF-κB信号通路有关.

FG-4592;星形胶质细胞;脂多糖;神经炎症

阮倩倩;赵名;耿亚楠;胡月;史子毕;朱玲玲;侯筱宇

徐州医科大学生物化学与分子生物学研究中心,江苏 徐州 221004;军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所,北京 100850;中国药科大学天然药物活性组分与药效国家重点实验室,江苏 南京 211198

中国药理学与毒理学杂志

[1]阮倩倩;赵名;耿亚楠;胡月;史子毕;朱玲玲;侯筱宇-.脯氨酸羟化酶抑制剂FG-4592抑制脂多糖诱导的星形胶质细胞炎症反应)[J].中国药理学与毒理学杂志,2022(06):410-417

D1A,LPS+FG

脯氨酸羟化酶抑制剂,脂多糖,星形胶质细胞,细胞炎症,C8,CCK,细胞存活率,低氧诱导因子,HIF,蛋白表达水平,实时定量,多聚,链反应,qPCR,葡萄糖转运蛋白,Glut1,血管内皮生长因子,VEGF,促红细胞生成素,EPO,原代,Toll,样受体,TLR4,磷酸化,抑制因子,P65,神经炎症

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