背景:前期工作发现同型半胱氨酸通过活性氧加速脐静脉内皮细胞衰老,此次实验初步研究影响内皮细胞衰老的相关机制.目的:探讨松果菊苷对人脐静脉内皮细胞中CPEB1、SIRT1、P53、P21基因表达的影响.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,加入10 g/L D-半乳糖构建细胞衰老模型,CCK-8法分析松果菊苷(0,10,20,50,100,200,300,400,500 mg/L)预处理12,24 h后的细胞增殖活性,筛选松果菊苷最佳质量浓度及干预时间;然后将人脐静脉内皮细胞分为5组:正常对照组,D-半乳糖组,松果菊苷100,200,300 mg/L组.β-半乳糖苷酶染色法检测松果菊苷预处理12 h后细胞染色阳性率,实时荧光定量-聚合酶链反应、蛋白免疫印迹法检测松果菊苷预处理12 h后人脐静脉内皮细胞中CPEB1、Sirt1、P53、P21 mRNA的表达和CPEB1、Sirt1、P21蛋白的表达.结果 与结论:①CCK-8检测结果表明:松果菊苷预处理12 h的细胞存活率明显高于预处理24 h,与D-半乳糖组相比,松果菊苷100,200,300 mg/L组均不同程度提高细胞活力(P<0.0001),3组间对比差异有显著性意义(P<0.01);②与正常对照组相比,D-半乳糖组β-半乳糖苷酶染色阳性率最高(P<0.0001),100,200,300 mg/L松果菊苷预处理12 h后,可一定程度降低β-半乳糖苷酶染色阳性率(P<0.0001);③与正常对照组相比,D-半乳糖组CPEB1、P53、P21 mRNA表达水平均升高(P<0.0001),Sirt1 mRNA表达水平降低(P<0.0001);与D-半乳糖组相比,100,200,300 mg/L松果菊苷预处理12 h后,CPEB1、P53、P21 mRNA表达水平均降低(P<0.0001),Sirt1 mRNA表达水平均升高(P<0.0001);蛋白免疫印迹分析结果与实时荧光定量-聚合酶链反应分析结果一致;④结果表明,松果菊苷可能通过下调CPEB1、P53、P21表达水平,上调Sirt1表达水平,来延缓D-半乳糖诱导的人脐静脉内皮细胞衰老.

松果菊苷;人脐静脉内皮细胞;衰老;CPEB1;Sirt1;P53;P21

田甜;欧阳·菊艳;李瑜;米叶赛·艾尼瓦尔;何娟丽;李振华;王红

新疆医科大学第一附属医院综合内二科,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830000

中国组织工程研究

[1]田甜;欧阳·菊艳;李瑜;米叶赛·艾尼瓦尔;何娟丽;李振华;王红-.松果菊苷延缓人脐静脉内皮细胞衰老的机制)[J].中国组织工程研究,2022(31):5014-5019

CPEB1

松果菊苷,人脐静脉内皮细胞,细胞衰老,前期工作,同型半胱氨酸,过活,研究影响,相关机制,SIRT1,P53,P21,体外培养,半乳糖,衰老模型,CCK,细胞增殖活性,正常对照,糖苷酶,染色法,细胞染色,聚合酶链反应,蛋白免疫印迹法,Sirt1,细胞存活率,细胞活力,平降,免疫印迹分析

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