目的 探究银杏酚酸对前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响及机制.方法 ①将DU 145细胞用不同浓度银杏酚酸(0,2.5,5,10,20,40,80,160μmol/L)培养48 h,通过MTT法检测细胞活力,通过AnnexinⅤ-FITC/PI染色法检测细胞凋亡.②将DU145细胞用0,80μmol/L的银杏酚酸培养48 h,作为对照组和80μmol/L银杏酚酸组(GA组).通过Western blot检测凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3和P53)的表达.③将DU145细胞分为8组:正常对照组、银杏酚酸组(GA组)、PD98059组、银杏酚酸+PD98059组(GA+PD98059组)、SP600125组、银杏酚酸+SP600125组(GA+SP600125组)、LY294002组、银杏酚酸+LY294002组(GA+LY294002组).对照组细胞不使用药物处理,GA组细胞使用80μmol/L的银杏酚酸培养48 h,PD98059组细胞使用50μmol/L的PD98059培养48 h,GA+PD98059组细胞使用80μmol/L的银杏酚酸和50μmol/L的PD98059共培养48 h,SP600125组细胞使用50μmol/L的SP600125培养48 h,GA+SP600125组细胞使用80μmol/L的银杏酚酸和50μmol/L的SP600125共培养48 h,LY294002组细胞使用50μmol/L的LY294002培养48 h,GA+LY294002组细胞使用80μmol/L的银杏酚酸和50μmol/L的LY294002共培养48 h,然后通过MTT法检测细胞活力,通过AnnexinⅤ-FITC/PI染色法检测细胞凋亡.④将BALB/c小鼠随机分为生理盐水组(NS组,n=6)、银杏酚酸低剂量组(GA-L组,10 mg/kg,n=6)、银杏酚酸中剂量组(GA-M组,50 mg/kg,n=6)、银杏酚酸高剂量组(GA-H组,100 mg/kg,n=6).所有小鼠皮下接种DU145细胞(4×105)建立荷瘤小鼠模型,接种第8天开始进行药物治疗.NS组小鼠腹腔注射生理盐水,GA-L组、GA-M组和GA-H组小鼠分别腹腔注射10,50,100 mg/kg的银杏酚酸,每周腹腔注射3次.每7 d用卡尺测量肿瘤大小.通过TUNEL染色检测肿瘤组织中的细胞凋亡.通过免疫组化染色检测肿瘤组织中Bax和Bcl-2的蛋白表达.通过Western blot检测肿瘤组织中Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3、P53、p-ERK、p-JNK和p-AKT的蛋白表达.结果 与0μmol/L比较,5,10,20,40,80,160μmol/L银杏酚酸处理后DU145细胞活力降低,细胞凋亡率升高(均P<0.05).与对照组比较,GA组DU145细胞中Bax、cleaved-Caspase-3和P53蛋白表达水平升高,而Bcl-2、p-ERK、p-JNK和p-AKT蛋白表达水平降低(均P<0.05).与对照组相比,GA组、PD98059组、SP600125组和LY294002组细胞活力降低,细胞凋亡率升高(P<0.05).与NS组相比,GA-L组、GA-M组和GA-H组肿瘤体积降低,肿瘤组织中TUNEL阳性率升高(均P<0.05).与NS组相比,GA-L组、GA-M组和GA-H组肿瘤组织中Bax、cleaved-Caspase-3和P53蛋白表达水平均升高,而Bcl-2、p-ERK、p-JNK和p-AKT蛋白表达水平均降低(P<0.05).结论 银杏酚酸可能通过ERK-JNK-AKT途径诱导前列腺癌细胞p53依赖性凋亡.

前列腺癌;银杏酚酸;p53;细胞凋亡;ERK-JNK-AKT途径

杨波;杜岳峰;马帅军

陕西省正和医院泌尿外科,西安 710061;西安交通大学第一附属医院泌尿外科;空军军医大学西京医院泌尿外科

山西医科大学学报

[1]杨波;杜岳峰;马帅军-.银杏酚酸通过ERK-JNK-AKT途径诱导前列腺癌细胞p53依赖性凋亡)[J].山西医科大学学报,2022(05):532-542

+PD98059,GA+PD98059,+SP600125,GA+SP600125,GA+LY294002

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