目的:探讨当归红芪超滤物(UFE-AH)对X射线引起人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用,阐明其可能的机制.方法:体外培养HUVECs,采用不同剂量(0、2、4、6、8和10 Gy)X射线辐射,筛选出最佳辐射剂量(6 Gy);用不同浓度(0、50、100、200、400、600、800和1000μg·L-1)UFE-AH干预HUVECs,筛选出最佳促增殖浓度(100、200和400μg·L-1).实验分为空白组、模型组(6 Gy X射线)、低剂量UFE-AH组(6 Gy X射线+100μg·L-1 UFE-AH)、中剂量UFE-AH组(6 Gy X射线+200μg·L-1 UFE-AH)和高剂量UFE-AH组(6 Gy X射线+400μg·L-1 UFE-AH).CCK-8法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,透射电子显微镜下观察各组细胞超微结构,Western blotting法检测各组细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、血管内皮生长因子(VEGF)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)蛋白表达水平.结果:CCK-8法检测,与0 Gy比较,当辐射剂量大于2 Gy时,辐射后48和72 h X射线对HUVECs的抑制率随辐射剂量增加而升高(P<0.05或P<0.01),6 Gy及6 Gy以上辐射剂量细胞抑制率升高更明显(P<0.01).与0μg·L-1 UFE-AH比较,100、200、400和600μg·L-1UFE-AH作用时细胞存活率升高(P<0.05或P<0.01),且100、200和400μg·L-1UFE-AH作用24、48和72 h时细胞存活率明显升高(P<0.01).与空白组比较,模型组细胞存活率明显降低(P<0.01);与模型组比较,中和高剂量UFE-AH组细胞存活率明显升高(P<0.01).流式细胞术检测,与空白组比较,模型组细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与模型组比较,低、中和高剂量UFE-AH组细胞凋亡率均明显降低(P<0.01).透射电子显微镜观察,空白组细胞膜完整,胞质较均匀,线粒体呈卵圆形,未见明显肿胀,胞内可见少量溶酶体;与空白组比较,模型组细胞重度肿胀,细胞膜多处破损,胞质稀松且出现多个空泡区,细胞核呈轻度不规则形,线粒体数量明显减少,呈轻度或中度肿胀,基质变浅且不均,线粒体少部分嵴局部断裂、变短,胞内可见较大量自噬溶酶体(ASS);与模型组比较,低、中和高剂量UFE-AH组细胞肿胀减轻,胞内细胞器空泡逐渐减少,线粒体肿胀减轻,数量增多,胞内可见一定量ASS,但仍未恢复正常.Western blotting法检测,与空白组比较,模型组细胞中PI3K、p-Akt、Bcl-2和VEGF蛋白表达水平明显降低(P<0.01),Bax和caspase-3蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值明显升高(P<0.01);与模型组比较,中和高剂量UFE-AH组细胞中PI3K、p-Akt、Bcl-2和VEGF蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Bax和caspase-3蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值明显降低(P<0.01).结论:一定剂量的UFE-AH对X射线引起的HUVECs损伤具有保护作用,其机制可能与UFE-AH影响HUVECs中PI3K、Akt、p-Akt、VEGF、Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达有关.

当归红芪超滤物;血管内皮细胞;细胞凋亡;X射线;辐射;放射治疗

武兵兵;张爱平;赵信科;李应东;刘凯

甘肃中医药大学中西医结合学院 中西医结合临床重点实验中心,甘肃 兰州 730000;甘肃中医药大学附属医院心血管内科,甘肃 兰州 730000

吉林大学学报（医学版）

[1]武兵兵;张爱平;赵信科;李应东;刘凯-.当归红芪超滤物对X射线引起人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及其机制)[J].吉林大学学报（医学版）,2022(05):1139-1147

1UFE

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