目的 探讨性维生素D(vitamin D,VD)对亚砷酸纳(NaAsO2)致SD大鼠肝纤维化损伤的保护作用.方法 健康初断乳SD大鼠18只,雌雄各半,按随机数字表法分为对照组(10 mL/kg生理盐水灌胃)、NaAsO2染毒组(10 mg/kg NaAsO2灌胃)、骨化三醇(VD3的生物活性代谢物)干预组(10 mg/kg NaAsO2灌胃,自第12周后NaAsO2灌胃的同时给予1.0 μg/kg骨化三醇灌胃),6d/周,连续36周,每周称量并记录大鼠体重.采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清25-羟维生素D3[25(OH)D3]含量及肝纤维化相关蛋白透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、Ⅲ 型前胶原氨基端肽(procollagen Ⅲ N-terminal peptide,P Ⅲ NP)、Ⅳ 型胶原(Ⅳcollagen,COL-Ⅳ)的分泌水平;HE染色观察各组大鼠肝组织基本病理变化,Masson染色和Sirius Red染色观察各组大鼠肝组织纤维化及胶原沉积情况;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测各组大鼠肝组织纤维化相关标志物α-平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β 1,TGF-βl)、波形蛋白(Vimentin)的表达水平.结果 NaAsO2染毒36周后,NaAsO2染毒组大鼠体重较对照组显著下降,给予骨化三醇干预后雌性大鼠体重较NaAsO2染毒组明显增加(P＜0.05).肝脏系数结果显示NaAsO2染毒组较对照组有所升高,而骨化三醇干预组与NaAsO2染毒组相比有所降低,其中在雌性大鼠中差异有统计学意义(P＜0.05).NaAsO2染毒组大鼠血清 25(OH)D3 含量(436.82±74.37)ng/L 明显低于对照组(550.21±29.16)ng/L(P＜0.05),而骨化三醇干预后大鼠血清25(OH)D3含量(1 135.07±95.07)ng/L显著高于NaAsO2染毒组(P＜0.05).与对照组相比,NaAsO2染毒组大鼠肝组织HE染色显示肝细胞形态异常,肝组织结构紊乱,出现假小叶及脂肪空泡增多;Masson及Sirius Red染色亦发现NaAsO2染毒组大鼠肝小叶结构异常,汇管区扩大变形并出现大量胶原纤维沉积,进一步分析显示其胶原沉积阳性着色面积较对照组明显增加(P＜0.05);骨化三醇干预组大鼠肝组织上述改变较NaAsO2染毒组明显改善(P＜0.05).Western Blot检测显示NaAsO2染毒组大鼠肝组织中 α-SMA、TGF-β1、Vimentin 表达水平分别为 1.12±0.21、1.12±0.26 和 1.31±0.15,显著高于对照组(0.57±0.10、0.64±0.13,0.72±0.16),ELISA 检测进一步发现NaAsO2染毒组大鼠血清肝纤维化相关因子HA、LN、P Ⅲ NP、COL-Ⅳ分泌水平[(87.92±9.67)、(89.04±ll.91)、(12.09±2.97)和(19.86±3.40)ng/mL]亦均高于对照组(P＜0.05);而经过骨化三醇干预后,大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、Vimentin表达水平(0.68±0.16、0.85±0.21、0.84±0.09)和血清 HA、LN、PⅢ NP、COL-Ⅳ 分泌水平[(54.29±7.23)、(55.56±9.43)、(6.49±1.08)和(10.15±1.99)ng/mL]均明显低于NaAsO2染毒组(P＜0.05).结论 VD3的生物活性代谢物骨化三醇干预可有效减轻长期NaAsO2暴露所致SD大鼠肝纤维化损伤程度.

维生素D;骨化三醇;砷;大鼠;肝纤维化

何瑞;范丽丽;宋倩;刁珩;徐慧芬;阮文丽;马璐;王大朋

贵州医科大学公共卫生与健康学院毒理学系,环境污染与疾病监控教育部重点实验室,贵阳 550025;贵阳市疾病预防控制中心,贵阳 550004

卫生研究

[1]何瑞;范丽丽;宋倩;刁珩;徐慧芬;阮文丽;马璐;王大朋-.活性维生素D对亚砷酸钠致SD大鼠肝纤维化损伤的保护作用)[J].卫生研究,2022(06):926-933

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