目的 研究谷氨酰胺通过PI3K/AKT/NF-κB信号通路抑制溃疡性结肠炎肠道炎症反应的作用和机制.方法 60只C57BL/6小鼠随机分为对照组(control)、模型组(model)、谷氨酰胺(Gln)、谷氨酰胺联合PI3K/AKT信号通路抑制剂组(Gln+LY294002)、LY294002和5-氨基水杨酸组(5-ASA),每组10只.除对照组外其余小鼠采用3％DSS水溶液连续饮用7d诱导溃疡性结肠炎模型.造模同时给药,对照组和模型组给予0.9％生理盐水灌胃,其余分别依照分组给予谷氨酰胺300 mg/(kg?d)灌胃,谷氨酰胺300 mg/(kg?d)灌胃+LY29400210 mg/(kg?d)腹腔注射,LY29400210 mg/(kg?d)腹腔注射,5-氨基水杨酸50 mg/(kg?d)灌胃.给药10d后,苏木素-伊红、阿利新蓝与过碘酸雪夫氏染色观察病理组织学变化,免疫组织化学法检测F4/80阳性巨噬细胞数量,免疫荧光标记法检测结肠组织磷酸化核转录因子-κBP65(phosphorylated-nuclear factor kappa-Bp65,p-NF-κBp65)的表达,实时荧光定量PCR法检测结肠上皮组织PI3K、AKT、NF-κB mRNA的表达,蛋白免疫印迹法法检测结肠组织PI3K/AKT/NF-κB信号通路关键蛋白的表达,酶联免疫吸附法法检测结肠组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量,比色法检测结肠组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)水平.结果 与对照组比较,模型组小鼠体重降低、稀便和大便出血,疾病活动度评分、病理组织学评分升高,结肠变短(P<0.01),结肠组织TNF-α、IL-6、MDA含量显著升高,SOD、GSH-Px含量降低(P<0.05),结肠组织p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-IκB/IκB、p-NF-κBp65/NF-κBp65蛋白表达比值升高(P<0.05);与模型组比较,各给药治疗组小鼠体重稀便和大便出血,疾病活动度评分、病理组织学评分,结肠长度均有显著改善(P<0.05),结肠组织TNF-α、IL-6、MDA含量降低,SOD、GSH-Px含量升高(P<0.05),结肠组织PI3K、AKT、NF-κB mRNA和p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-IκB/IκB、p-NF-κBp65/NF-κBp65蛋白表达比值降低(P<0.05).结论 谷氨酰胺通过抑制氧化应激损伤和炎症反应对DSS诱导的小鼠结肠炎有明显的治疗作用,其作用与抑制PI3K/AKT/NF-κB信号通路活性相关.

溃疡性结肠炎;谷氨酰胺;PI3K/AKT/NF-κB信号通路;炎症反应;小鼠

陈志国;魏海梁;闫曙光;李京涛;罗慧

陕西中医药大学附属医院,咸阳 712000;陕西中医药大学基础医学院,咸阳 712046

营养学报

[1]陈志国;魏海梁;闫曙光;李京涛;罗慧-.谷氨酰胺通过PI3K/AKT/NF-κB信号通路抑制炎症反应治疗溃疡性结肠炎)[J].营养学报,2022(06):577-585

Gln+LY294002,+LY29400210,LY29400210

谷氨酰胺,PI3K,AKT,抑制炎症,溃疡性结肠炎,肠道炎症反应,C57BL,control,model,信号通路抑制剂,水杨酸,ASA,DSS,水溶液,饮用,7d,结肠炎模型,生理盐水,水灌,灌胃,腹腔注射,10d,苏木,木素,伊红,阿利,碘酸,病理组织学,免疫组织化学法,F4,巨噬细胞,细胞数量,免疫荧光标记,荧光标记法,结肠组织,磷酸化,核转录因子,BP65,phosphorylated,nuclear,kappa,Bp65,上皮组织,蛋白免疫印迹法,关键蛋白,酶联免疫吸附法,tumor,necrosis,interleukin,比色法,superoxide,dismutase,malondialdehyde,谷胱甘肽过氧化物酶,glutathione,peroxidase,GSH,Px,体重降低,大便,疾病活动度评分,分升,变短,含量降低,达比,肠长,抑制氧化,氧化应激损伤,治疗作用,活性相

0.240667