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十二指肠贾第虫端粒酶逆转录酶RNA结合域TRBD互作蛋白的筛选及验证
文献摘要：
目的 利用酵母双杂交系统筛选十二指肠贾第虫端粒酶逆转录酶RNA结合域TRBD的互作蛋白,并验证其是否存在互作关系.方法 通过分子克隆技术构建诱饵质粒pGBKT7-TRBD),应用酵母双杂交技术将诱饵质粒与贾第虫酵母双杂交cDNA质粒文库共转化至Y2H Gold酵母感受态细胞中,通过不同营养缺陷型培养基筛选杂交成功的菌落.对筛选出的阳性克隆进行回返试验,并通过双分子荧光互补试验及GST-Pull down试验进一步验证二者存在的互作关系.结果 诱饵质粒pGBKT7-TRBD经双酶切和测序鉴定证明构建正确.该诱饵质粒在贾第虫酵母双杂交 cDNA 质粒文库中初步筛选得到 5 个阳性克隆,即 histone acetyltransferase type B subunit 2、bZIP family protein、WD-repeat protein、NHL repeat-containing protein、heat shock protein 90(Hsp90),经回返验证、双分子荧光互补和GST-Pull down试验确定阳性基因Hsp90与TRBD存在互作关系.结论 利用酵母双杂交技术成功筛选出与十二指肠贾第虫端粒酶TRBD存在相互作用的Hsp90,为进一步探索贾第虫端粒酶调控机制奠定了基础.
文献关键词：
十二指肠贾第虫;端粒酶逆转录酶;TRBD;酵母双杂交;蛋白相互作用
中图分类号：
作者姓名：
明珠;张西臣;赵春艳;张楠;程淑琴;王晓岑;李新;李建华;宫鹏涛;张媛媛
作者机构：
吉林大学动物医学学院,吉林长春130062;吉林大学人兽共患病研究所,吉林长春130062
文献出处：
引用格式：
[1]明珠;张西臣;赵春艳;张楠;程淑琴;王晓岑;李新;李建华;宫鹏涛;张媛媛-.十二指肠贾第虫端粒酶逆转录酶RNA结合域TRBD互作蛋白的筛选及验证)[J].中国生物制品学杂志,2022(05):575-582
A类：
TRBD
B类：
十二指肠贾第虫,端粒酶逆转录酶,互作蛋白,酵母双杂交系统,互作关系,分子克隆,克隆技术,技术构建,诱饵,质粒,pGBKT7,酵母双杂交技术,cDNA,文库,共转化,Y2H,Gold,感受态,培养基筛选,菌落,回返,双分子荧光互补,GST,Pull,down,双酶,初步筛选,选得,histone,acetyltransferase,type,subunit,bZIP,family,protein,WD,repeat,NHL,containing,heat,shock,Hsp90,调控机制,蛋白相互作用
AB值：
0.247972
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