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青海血蜱重组rHq002蛋白包涵体的纯化
文献摘要：
目的 对青海血蜱重组rHq002蛋白包涵体进行复性及纯化.方法 将重组质粒pET-30a-Hq002转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导表达重组Hq002蛋白;超声破碎菌体,收集细胞碎片,用PBS缓冲液和低浓度尿素进行多次洗涤;洗涤后的包涵体用6 mol/L盐酸胍溶解,稀释法进行蛋白复性;用镍离子亲和层析法纯化蛋白后,分别于4和-20℃保存7d后进行12％ SDS-PAGE鉴定.结果 经PBS缓冲液和低浓度尿素多次洗涤,可去除大量的水溶性杂质和部分水不溶性杂蛋白,初步纯化了包涵体;包涵体经6 mol/L盐酸胍溶解后可直接稀释复性重组蛋白;经镍离子亲和层析纯化后的蛋白相对分子质量约27000,与预期相符,4和-20℃保存7d未出现降解或者聚集.结论 成功获得含二硫键的蜱源重组蛋白,本研究的复性纯化方法可为纯化包涵体蛋白提供参考.
文献关键词：
蜱源蛋白质;包涵体;复性;纯化
中图分类号：
作者姓名：
马静;陈开廷;曹美娜;刘玉婷;马婧;高金亮
作者机构：
包头医学院,内蒙古包头014000;鄂尔多斯市中心医院,内蒙古鄂尔多斯017000
文献出处：
引用格式：
[1]马静;陈开廷;曹美娜;刘玉婷;马婧;高金亮-.青海血蜱重组rHq002蛋白包涵体的纯化)[J].中国生物制品学杂志,2022(01):91-94,99
A类：
rHq002,Hq002,蜱源蛋白质
B类：
白包,包涵体,重组质粒,pET,30a,coli,Rosetta,DE3,IPTG,诱导表达,超声破碎,菌体,PBS,缓冲液,洗涤,体用,盐酸胍,稀释法,镍离子,亲和层析,层析法,7d,SDS,PAGE,可去,水溶性,分水,直接稀释,重组蛋白,层析纯化,白相,相对分子质量,二硫键,纯化方法
AB值：
0.325042
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