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牛病毒性腹泻-黏膜病病毒噬菌体单链抗体库的构建和筛选
文献摘要：
为筛选牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)gP48蛋白的单链抗体,本研究利用噬菌体展示技术构建了 gP48蛋白单链抗体克隆文库,通过微孔筛选法对抗体库进行3轮富集淘筛,利用ELISA技术测定单链抗体的亲和力,对亲和力较高的克隆进行基因测序分析和结合活性测定,旨在获得gP48蛋白的单链抗体.结果表明:1)成功构建了库容量为4.3×107的噬菌体单链抗体库,其重组率为83.3％,经三轮筛选对噬菌体抗体库进行富集,富集倍数为1.43×104;2)优化了间接ELISA方法,筛选到3株与BVDV gP48蛋白具有高亲和力的单链抗体以及其基因序列,通过IgBLAST分析显示,3株单链抗体均为鼠源IgG.综上,从gP48蛋白的单链抗体库中筛选获得3个具有高亲和力的单链抗体,可用于后续BVDV检测方法的建立.
文献关键词：
牛病毒性腹泻病毒;gP48蛋白;噬菌体抗体库;单链抗体;亲和筛选
中图分类号：
作者姓名：
孔梓安;宋想胜;程如楠;甄思慧;吴竹青;吴清民;王真
作者机构：
北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中兽医)北京市重点实验室,北京102206;中国农业大学动物医学院,北京100193
文献出处：
引用格式：
[1]孔梓安;宋想胜;程如楠;甄思慧;吴竹青;吴清民;王真-.牛病毒性腹泻-黏膜病病毒噬菌体单链抗体库的构建和筛选)[J].中国农业大学学报,2022(09):64-71
A类：
gP48,IgBLAST,亲和筛选
B类：
单链抗体,Bovine,viral,diarrhea,virus,BVDV,研究利用,噬菌体展示技术,技术构建,文库,微孔,定单,亲和力,基因测序,测序分析,结合活性,活性测定,库容量,三轮,选对,噬菌体抗体库,富集倍数,基因序列,IgG,牛病毒性腹泻病毒
AB值：
0.180736
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