典型文献
灵芝UDP-葡萄糖4-差向异构酶酶学性质研究及其应用
文献摘要：
[背景]灵芝多糖是灵芝的重要活性物质之一.UDP-葡萄糖4-差向异构酶(UDP-glucose 4-epimerase,UGE,EC 5.1.3.2)是灵芝多糖合成途径中糖供体生成的重要酶,其参与了 UDP-葡萄糖与UDP-半乳糖的相互转化,与多糖中半乳糖残基含量密切相关.[目的]通过对来源于灵芝的UGE基因进行异源表达,丰富灵芝多糖糖供体合成途径重要酶的酶学特性信息,深入了解灵芝多糖代谢合成途径.[方法]以灵芝菌株(Ganodermna lingzhi)CGMCC 5.26的cDNA为模板,克隆得到UGE基因GL30389,并在EscherichiacoliBL21(DE3)中诱导表达,产物纯化后进行酶学性质、酶动力学、底物专一性及转化率的研究.[结果]灵芝UGE的分子量为45kDa.最适反应pH值为6.0,在pH 7.0-9.0范围内有较好的稳定性;最适反应温度为30℃,温度在40℃时稳定性最好.Fe2+和Mg2+对UGE有激活作用.以UDP-葡萄糖为底物时,Km为0.824 mmol/L,Vmax为769.230 μmol/(L-min),kcat为1.333 s-1,kcat/Km为1.618 L/(mmol-s).灵芝UGE对D-葡萄糖、半乳糖醛酸及N-乙酰葡萄糖胺有催化活性.通过优化pH、温度、底物与酶的配比、添加金属离子将转化率从16.0％提升至39.4％.[结论]灵芝UGE与植物来源的UGE酶学性质较为相似,其催化效率优于大部分细菌来源的UGE.本研究丰富了灵芝多糖糖供体合成途径重要酶的酶学特性信息,有利于深入了解灵芝多糖代谢合成途径.
文献关键词：
灵芝;UDP-葡萄糖4-差向异构酶;酶学性质;底物专一性;转化率
中图分类号：
作者姓名：
顾榕;赵丽婷;顾正华;李由然;石贵阳;丁重阳
作者机构：
江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心,江苏无锡214122;江南大学江苏省生物活性制品加工工程技术研究中心,江苏无锡214122
文献出处：
引用格式：
[1]顾榕;赵丽婷;顾正华;李由然;石贵阳;丁重阳-.灵芝UDP-葡萄糖4-差向异构酶酶学性质研究及其应用)[J].微生物学通报,2022(10):4090-4103
A类：
UGE,Ganodermna,GL30389,EscherichiacoliBL21,45kDa
B类：
UDP,差向异构,异构酶,酶学性质,灵芝多糖,活性物质,glucose,epimerase,EC,合成途径,供体,相互转化,残基,异源表达,糖糖,酶学特性,糖代谢,灵芝菌,lingzhi,CGMCC,cDNA,DE3,诱导表达,酶动力学,底物专一性,分子量,反应温度,Fe2+,Mg2+,Km,Vmax,kcat,半乳糖醛酸,催化活性,金属离子,植物来源,催化效率
AB值：
0.241095
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