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典型文献
应用2种RT-PCR方法检测和分析北京市市场销售牡蛎中诺如病毒基因特征
文献摘要:
目的:应用实时荧光RT-PCR和半巢式RT-PCR方法检测和分析牡蛎中诺如病毒的基因特征。方法:应用实时荧光RT-PCR和半巢式RT-PCR方法,对2014年11月至2015年10月北京市采集的新鲜市售牡蛎进行诺如病毒GⅠ/GⅡ组并联试验检测,分析检出率,应用符合率和一致性检验(Kappa值)对半巢式RT-PCR方法进行可靠性评价,应用半巢式RT-PCR方法扩增诺如病毒GⅠ/GⅡ衣壳蛋白区基因,对阳性产物进行测序。采用BioEdit 7.0.9.0软件进行序列比对、Mega 6.0软件构建进化树。结果:72份样品中,实时荧光RT-PCR、半巢式RT-PCR和并联试验的诺如病毒检出率分别为31.94%(23/72)、38.89%(28/72)和48.61%(35/72)。2种方法符合率为73.61%,中度一致(Kappa值=0.43)。测序成功13株诺如病毒,11株(7株GⅡ.17、2株GⅡ.4 Sydney_2012、1株GⅡ.1和1株GⅡ.21基因型)为2种RT-PCR方法检测诺如病毒阳性样本所得;2株(GⅡ.17和GⅡ.3基因型各1株)为半巢式RT-PCR方法检测诺如病毒阳性样本、实时荧光RT-PCR方法检测诺如病毒阴性样本所得。这些毒株与腹泻患者、环境污水和贝类水产品参考株的相似性为84.4%~100.0%。结论:用2种RT-PCR并联法检测牡蛎中诺如病毒,不仅能提高检出率还能获得更多基因型;牡蛎中诺如病毒毒株与人源、环境污水及贝类水产品参考毒株高度同源,应对经常接触牡蛎的人群及相关环境进行诺如病毒监测和防控。
文献关键词:
诺如病毒;实时荧光反转录聚合酶链式反应;半巢式反转录聚合酶链式反应;基因特征;牡蛎
作者姓名:
严寒秋;王永全;崔海洋;靳博;高志勇;王全意
作者机构:
北京市疾病预防控制中心/北京市预防医学研究中心 食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室,北京 100013;北京市西城区疾病预防控制中心,北京 100120
引用格式:
[1]严寒秋;王永全;崔海洋;靳博;高志勇;王全意-.应用2种RT-PCR方法检测和分析北京市市场销售牡蛎中诺如病毒基因特征)[J].中华流行病学杂志,2022(01):92-97
A类:
实时荧光反转录聚合酶链式反应,半巢式反转录聚合酶链式反应
B类:
市场销售,牡蛎,病毒基因,基因特征,市售,试验检测,符合率,一致性检验,Kappa,可靠性评价,衣壳蛋白,白区,BioEdit,序列比对,Mega,软件构建,进化树,Sydney,基因型,病毒阳性,阳性样本,腹泻患者,环境污水,贝类,水产品,高检,多基因,病毒毒株,株高,诺如病毒监测
AB值:
0.246131
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