典型文献
几种外来动物病毒多重普通和实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用
文献摘要：
为了能够同时开展对小反刍兽疫病毒(PPRV)、蓝舌病血清8型病毒(BTV8)、鹿流行性出血热血清1型病毒(EHDV1)和非洲马瘟病毒(AHSV)4种外来动物疫病病原体的核酸检测,本试验根据GenBank中相关病毒序列设计引物和探针,建立多重普通逆转录PCR(RT-PCR)和实时荧光定量RT-PCR检测方法,并在采集的临床样本检测中进行初步应用验证.结果显示:建立的PPRV/BTV8/EHDV1三重实时荧光定量RT-PCR检测方法仅对PPRV、BTV8和EHDV1有特异荧光信号,检测敏感度可达101.70～102.08copies/μL DNA;建立的PPRV/BTV8/EHDV1/AHSV四重普通RT-PCR方法可特异性同步检测PPRV、BTV8、EHDV1和AHSV,检测敏感度可达103 copies/μL DNA;2种方法对羊痘、羊口疮、口蹄疫、阿卡斑、牛病毒性腹泻等临床相似的病毒均无扩增.在925份临床样本中检测出1例PPRV核酸阳性样本;经核苷酸序列测定及BLAST比对确定为谱系Ⅳ型PPRV毒株序列.本试验所建立的三重实时荧光定量RT-PCR检测方法和四重普通RT-PCR方法可特异性同步检测相应的3种或4种病毒病原,且具有临床样本检测的应用潜力.
文献关键词：
小反刍兽疫病毒;蓝舌病病毒8型;流行性出血热病毒1型;非洲马瘟病毒;四重普通RT-PCR;三重实时荧光定量RT-PCR
中图分类号：
作者姓名：
赵文华;李富祥;杨仕标
作者机构：
云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室,云南昆明650224
文献出处：
引用格式：
[1]赵文华;李富祥;杨仕标-.几种外来动物病毒多重普通和实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用)[J].中国兽医杂志,2022(02):27-33,38
A类：
BTV8,EHDV1,AHSV,08copies
B类：
动物病毒,初步应用,小反刍兽疫病毒,PPRV,流行性出血热,热血,非洲马瘟病毒,动物疫病,病原体,核酸检测,GenBank,序列设计,引物,逆转录,临床样本,应用验证,荧光信号,四重,同步检测,羊痘,羊口疮,口蹄疫,阿卡,牛病毒性腹泻,临床相,阳性样本,序列测定,BLAST,毒株,病毒病,蓝舌病病毒,热病
AB值：
0.202581
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