目的:探讨铅(Pb)暴露诱导小鼠神经元铜(Cu)蓄积,促进细胞氧化应激损伤的机制.方法:C57BL/6小鼠饮用300 ppm醋酸铅水溶液2个月建立铅暴露动物模型;小鼠海马神经元细胞系HT22细胞暴露于0～100 μmol/L醋酸铅24 h,采用噻唑蓝(MTT)法筛选适宜的铅作用剂量,建立铅暴露细胞模型.石墨炉原子吸收分光光度法(AAS)检测铅暴露后小鼠脑组织和HT22细胞铜水平变化;Western Blot法检测铅暴露对小鼠脑组织和HT22细胞中铜转运蛋白1(CTR1)、铜转运ATP酶α肽(ATP7A)、铜转运ATP酶β肽(ATP7B)表达水平的影响;2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法、硫代巴比妥酸比色法(TBA)分别测定铅暴露后HT22细胞内活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)活性变化情况,并观察特异性铜螯合剂四硫代钼酸铵(TTM)的保护作用.结果:与对照组相比,铅暴露组小鼠血铜水平降低,而皮质和海马组织铜水平均显著升高(P＜0.05);以5、10 μmol/L铅暴露24 h后,HT22细胞的铜吸收呈剂量-依赖性增高(P＜0.05).铅暴露后小鼠脑组织和HT22细胞中CTR1蛋白水平显著增高,而ATP7A和ATP7B蛋白水平显著降低(P＜0.05).铅暴露引起HT22细胞ROS、MDA水平较对照组呈剂量-依赖性升高(P＜0.05);而TTM的处理逆转了铅暴露引起的氧化应激(P＜0.05).结论:铅暴露可能通过影响神经元铜转运蛋白水平导致细胞铜蓄积,进而诱导细胞氧化应激损伤.

铅;铜蓄积;铜转运蛋白;氧化应激;过氧化损伤;小鼠

王德胜;郑刚;王涛;赵再华;陈景元

中国人民解放军医学院,北京100853;中国人民解放军总医院,北京100853;空军军医大学军事预防医学系,特殊作业环境危害评估与防治教育部重点实验室,西安710032

神经解剖学杂志

[1]王德胜;郑刚;王涛;赵再华;陈景元-.铅暴露诱导铜蓄积对小鼠神经元氧化应激的促进作用)[J].神经解剖学杂志,2022(04):367-373

铜蓄积,铜转运蛋白

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