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典型文献
MicroRNA-145通过Wnt/β-catenin 通路调控神经元氧化应激和凋亡在癫痫中的作用及机制研究
文献摘要:
目的 探讨微小RNA-145(miR-145)在原代培养海马神经元癫痫模型中的作用及其分子机制.方法 培养原代海马神经元细胞,构建无镁生理外液诱导的原代培养海马神经元癫痫模型.将细胞分为对照组、模型组、模拟物对照组(NC mimic组)、miR-145模拟物组(miR-145 mimic组)、miR-145 模拟物+空载质粒组(miR-145 mimic+Vector组)、miR-145模拟物+WNT2B过表达质粒组(miR-145 mimic+pcDNA-WNT2B组).实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测各组神经元细胞中miR-145的表达;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;ELISA试剂盒检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的含量;Western blotting 检测各组细胞中 Bcl-2、Cleaved-caspase 3、β-catenin 和Cyclin D1蛋白的表达.生物信息学软件和双荧光素酶报告基因实验分别预测和验证miR-145和WNT2B的靶向关系.结果 与对照组比较,模型组神经元细胞中miR-145表达显著降低,MDA水平显著升高,GSH和SOD水平显著降低,细胞凋亡率显著升高,Bcl-2蛋白水平显著降低,Cleaved caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05).与NC mimic组比较,miR-145 mimic组神经元细胞中miR-145表达显著升高,MDA水平显著降低,GSH和SOD水平显著升高,细胞凋亡率显著降低,Bcl-2蛋白水平显著升高,Cleaved caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05).miR-145与WNT2B 3'-UTR靶向结合.与miR-145 mimic+Vector组比较,miR-145 mimic+pcDNA-WNT2B组神经元细胞中WNT2B蛋白表达显著升高,MDA水平显著升高,GSH和SOD水平显著降低,细胞凋亡率显著升高,Bcl-2蛋白水平显著降低,Cleaved caspase-3、β-catenin和Cyclin D1蛋白水平显著升高(P<0.05).结论 miR-145通过靶向WNT2B调控Wnt/β-catenin通路抑制癫痫模型海马神经元氧化应激和凋亡.
文献关键词:
MicroRNA-145;癫痫;Wnt/β-catenin信号通路;氧化应激;凋亡
作者姓名:
孙衍昶;徐鹏翔;欧阳一彬;莫业和
作者机构:
570216海口,海南医学院第二附属医院神经外科
引用格式:
[1]孙衍昶;徐鹏翔;欧阳一彬;莫业和-.MicroRNA-145通过Wnt/β-catenin 通路调控神经元氧化应激和凋亡在癫痫中的作用及机制研究)[J].脑与神经疾病杂志,2022(12):727-733
A类:
+WNT2B
B类:
MicroRNA,Wnt,catenin,miR,原代培养,癫痫模型,原代海马神经元,海马神经元细胞,NC,空载,粒组,mimic+Vector,过表达质粒,mimic+pcDNA,qPCR,实验检测,流式细胞术,试剂盒,中超,谷胱甘肽,GSH,blotting,Bcl,Cleaved,caspase,Cyclin,D1,生物信息学软件,双荧光素酶报告基因实验,细胞凋亡率,UTR
AB值:
0.158058
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