典型文献
裂殖壶菌pks基因启动子的克隆及活性检测
文献摘要:
为了探究裂殖壶菌(Aurantiochytrium limacinum)合成DHA的关键酶基因pks1和pks3的启动子活性,本实验首先通过染色体步移技术得到pks1和pks3基因的5'端上游序列,然后经生物信息学软件分析初步确定两段序列具有启动子特征,含有上游调控元件,可能具有启动子活性;进而以绿色荧光蛋白作为报告基因,构建了原核表达载体pAcGFP1-1-pks1 promoter和pAcGFP1-1-pks3 promoter,以及真核表达载体pYD1-pks1 promoter-GFP 和pYD1-pks3 promoter-GFP,并分别转化大肠杆菌E.coli BL21和酿酒酵母S.cerevisiae EBY100,通过荧光光谱及SDS-PAGE分析等来检测重组菌株绿色荧光蛋白表达情况.结果表明这两段序列,能够使绿色荧光蛋白在原核表达系统及真核表达系统中实现异源表达,具有启动活性,可以用作基因工程中的启动子元件.
文献关键词:
染色体步移技术;pks基因;启动子;荧光光谱;SDS-PAGE
中图分类号:
作者姓名:
王振东;臧晓南;丛晓梅;朱清
作者机构:
中国海洋大学海洋生物遗传育种教育部重点实验室,山东青岛266003
文献出处:
引用格式:
[1]王振东;臧晓南;丛晓梅;朱清-.裂殖壶菌pks基因启动子的克隆及活性检测)[J].海洋湖沼通报,2022(05):27-32
A类:
裂殖壶菌,Aurantiochytrium,limacinum,pks1,pks3,pAcGFP1,pYD1,EBY100
B类:
基因启动子,活性检测,DHA,关键酶基因,启动子活性,染色体步移技术,端上,生物信息学软件,两段,段序列,绿色荧光蛋白,报告基因,原核表达载体,promoter,真核表达载体,大肠杆菌,coli,BL21,酿酒酵母,cerevisiae,荧光光谱,SDS,PAGE,重组菌株,表达系统,异源表达,启动活性,基因工程
AB值:
0.214866
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