中华乌塘鳢(Bostrychus sinensis)属于广盐广温、低氧耐受性强、药用价值高的鱼类,为我国东南沿海重要养殖对象.谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)是生物体内重要的抗氧化酶,能够清除过氧化氢防止机体生物膜氧化受损,研究中华乌塘鳢GPx基因对其养殖及海洋生态研究具有重要意义.利用分子克隆技术获得了中华乌塘鳢GPx7和GPx8(分别命名为BsGPx7和BsGPx8)的cDNA序列.BsGPx7编码186个氨基酸,含有2个半胱氨酸(Cys56和Cys85)催化位点;BsGPx8编码210个氨基酸,含有1个半胱氨酸(Cys109)催化位点.利用RT-PCR方法研究了 BsGPx7、BsGPx8基因在中华乌塘鳢组织中的分布表达,以及不同浓度镉离子(7.5,15,30 mg/L)胁迫下BsGPx7、BsGPx8基因的表达量变化.结果显示,BsGPx7和BsGPx8在组织中呈泛在性表达,其中肝脏的表达量最高,其次是鳃和皮肤.不同浓度的镉离子胁迫下,BsGPx7基因在鳃和皮肤中的表达量均显著上调(P＜0.05),BsGPx8基因在肝脏、鳃和皮肤中的表达量均显著上调(P＜0.05).成功构建了原核表达载体,表达并纯化获得了 BsGPx7重组蛋白(rBsGPx7).对rBsGPx7在不同温度和pH条件下的酶活性进行了测定,表明rBsGPx7在35℃和pH8条件下酶活性最高.综上提示,BsGPx7与BsGPx8参与了机体对抗镉离子诱导的氧化应激的过程,可能在抗氧化防御中起一定作用.

谷胱甘肽过氧化物酶(GPx);中华乌塘鳢(Bostrychus sinensis);镉离子;基因表达;酶活性

丁浪;夏立萍;沈斌;张建设

浙江海洋大学 国家海洋设施养殖工程技术研究中心 浙江舟山 316022

海洋与湖沼

[1]丁浪;夏立萍;沈斌;张建设-.中华乌塘鳢(Bostrychus sinensis)GPx7和GPx8基因的克隆、表达与酶活性分析)[J].海洋与湖沼,2022(03):697-709

中华乌塘鳢,Bostrychus,GPx7,GPx8,BsGPx7,BsGPx8,Cys56,Cys85,Cys109,rBsGPx7

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