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海洋弧菌HN897β-琼脂糖酶基因vas1-1339异源表达及活性分析
文献摘要：
海洋弧菌HN897株是一株高产琼脂糖酶的Vibrio astriarenae菌,前期功能缺失实验证明其 β-琼脂糖酶基因vas1-1339的缺失可显著降低弧菌HN897株的琼脂水解活性.文章在大肠杆菌中异源表达Vas1-1339基因编码蛋白,分析该基因的表达及蛋白功能活性.首先,构建含vas1-1339基因开放阅读框全长的表达载体pET28a-1339,利用原核表达技术在大肠杆菌中成功地异源表达了Vas1-1339琼脂糖酶;然后,利用卢戈氏碘液染色分析发现异源表达Vas1-1339琼脂糖酶的大肠杆菌能够高效水解琼脂,且异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)最优诱导浓度为10μmol·L-1;免疫印迹分析发现胞内基因表达产物羧基端可能存在切割现象,推测Vas1-1339琼脂糖酶存在复杂的成熟过程.对纯化的琼脂糖酶活性分析发现海洋弧菌HN897株β-琼脂糖酶Vas1-1339能够独立发挥琼脂糖降解功能.
文献关键词：
β-琼脂糖酶;海洋弧菌;琼脂糖酶解;异源蛋白表达
中图分类号：
作者姓名：
喻飞;金兴坤;雷天影;曹海航;陈锵辉;阳耀帆;李佳航;赵哲
作者机构：
河海大学海洋学院, 海洋生物技术与资源利用研究所, 江苏 南京 210098
文献出处：
引用格式：
[1]喻飞;金兴坤;雷天影;曹海航;陈锵辉;阳耀帆;李佳航;赵哲-.海洋弧菌HN897β-琼脂糖酶基因vas1-1339异源表达及活性分析)[J].热带海洋学报,2022(02):170-176
A类：
HN897,vas1,astriarenae,Vas1,琼脂糖酶解
B类：
海洋弧菌,酶基因,异源表达,活性分析,一株,株高,Vibrio,失实,水解活性,大肠杆菌,基因编码,编码蛋白,蛋白功能,功能活性,开放阅读框,全长,表达载体,pET28a,原核表达,碘液,染色分析,异丙基,半乳糖,糖苷,IPTG,免疫印迹分析,达产,羧基端,成熟过程,异源蛋白表达
AB值：
0.226898
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