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大黄鱼肿瘤抑制因子cylindromatosis(LcCYLD)的序列与免疫反应特征及其功能
文献摘要：
为研究大黄鱼肿瘤抑制因子cylindromatosis(CYLD)在免疫反应中的作用,本实验克隆了大黄鱼CYLD的全长cDNA(命名为LcCYLD)并对其进行序列分析;采用实时荧光定量PCR(qPCR)的方法对大黄鱼各组织及免疫刺激后的大黄鱼肾细胞系中的LcCYLD表达变化进行检测;构建了重组表达载体pTurboGFP-CYLD及pcDNA3.1-CYLD,分别用于亚细胞定位实验及过表达实验;在HEK293T细胞系中过表达LcCYLD后采用双荧光素酶报告系统检测了NF-κB、TNF-α及IL-1β启动子活性的变化.结果显示,LcCYLD的ORF包含2754 bp,编码917个氨基酸,推测具有保守的3个N端的CAP-GLY结构域,1个磷酸化区域和1个C端的UCH结构域,多序列比对结果显示各物种CYLD间高度保守;系统进化分析显示,LcCYLD与来源于其他硬骨鱼的CYLD聚为一支,其中与条纹狼鲈的CYLD关系最近;转录水平表达分析发现,LcCYLD在大黄鱼各组织均有表达,其中在脑中表达量最高;LPS及poly I:C刺激能够显著诱导LcCYLD的表达;亚细胞定位实验表明LcCYLD在细胞质及细胞核中均有表达;过表达LcCYLD能够显著抑制NF-κB及促炎细胞因子TNF-α及IL-1β的转录激活.以上研究结果表明,大黄鱼CYLD能够抑制NF-κB的转录激活,为深入了解LcCYLD在大黄鱼先天免疫信号转导中的作用奠定基础.
文献关键词：
大黄鱼;肿瘤抑制因子;亚细胞定位;过表达;免疫;抑制
中图分类号：
作者姓名：
张萌;罗云江;姚翠鸾
作者机构：
集美大学水产学院,福建 厦门 361021
文献出处：
引用格式：
[1]张萌;罗云江;姚翠鸾-.大黄鱼肿瘤抑制因子cylindromatosis(LcCYLD)的序列与免疫反应特征及其功能)[J].水产学报,2022(05):805-814
A类：
cylindromatosis,LcCYLD,pTurboGFP
B类：
大黄鱼,肿瘤抑制因子,免疫反应,反应特征,全长,序列分析,qPCR,免疫刺激,肾细胞,细胞系,表达变化,重组表达,表达载体,pcDNA3,亚细胞定位,定位实验,过表达,HEK293T,双荧光素酶报告系统,系统检测,启动子活性,ORF,bp,CAP,GLY,结构域,磷酸化,UCH,多序列比对,系统进化分析,硬骨鱼,条纹,转录水平,表达分析,LPS,poly,细胞质,细胞核,促炎细胞因子,转录激活,先天免疫,信号转导
AB值：
0.231115
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