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解淀粉芽孢杆菌Q-426酚酸脱羧酶的克隆表达及酶学性质鉴定
文献摘要：
目的:生物法脱羧制备4-乙烯基衍生物具有诸多优势和良好的发展前景,研究解淀粉芽孢杆菌Q-426酚酸脱羧酶(BaPAD-Q-426)的酶学性质,为其进一步应用提供理论基础.方法:从解淀粉芽孢杆菌中克隆酚酸脱羧酶基因;以pET-28a(+)为载体,将重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)中,实现酚酸脱羧酶BaPAD-Q-426的高效表达,利用Ni-NTA亲和层析进行纯化,并进行酶学性质鉴定.结果:酚酸脱羧酶BaPAD-Q-426在pH7.0～9.0范围内保持良好的pH稳定性,最适pH为8.0;在25～40℃范围内保持着较高的酶活性,最适温度为35℃,在4℃时保持30 min后该酶依然保持95％以上的酶活性;K+对BaPAD-Q-426的酶活具有明显促进作用,酶活力提高60％;该酶在石油醚中具有良好的耐受能力,在40％石油醚存在下,仍保留50％以上的酶活力;BaPAD-Q-426的最适底物为阿魏酸,酶活力达到19.5 IU/mL.结论:与其他来源的酚酸脱羧酶相比,BaPAD-Q-426在低温时具有更好的稳定性,在弱碱性环境下对阿魏酸的催化脱羧能力最强.
文献关键词：
酚酸脱羧酶;解淀粉芽孢杆菌;酶学性质
中图分类号：
作者姓名：
任明杰;王璐璐;申纪辉;范若辰;许永斌;张丽影;郑维;权春善
作者机构：
大连民族大学生命科学学院 生物技术与资源利用教育部重点实验室 大连 116600;大连理工大学生物工程学院 大连 116024
文献出处：
引用格式：
[1]任明杰;王璐璐;申纪辉;范若辰;许永斌;张丽影;郑维;权春善-.解淀粉芽孢杆菌Q-426酚酸脱羧酶的克隆表达及酶学性质鉴定)[J].中国生物工程杂志,2022(06):20-29
A类：
酚酸脱羧酶,BaPAD
B类：
解淀粉芽孢杆菌,克隆表达,酶学性质,性质鉴定,生物法,乙烯基,衍生物,酶基因,pET,28a,重组质粒,coli,BL21,DE3,高效表达,NTA,亲和层析,pH7,保持良好,K+,酶活力,石油醚,耐受能力,底物,阿魏酸,力达,IU,弱碱,碱性环境,催化脱羧
AB值：
0.225364
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